在干擾存在時,方法的選擇性或特異性是進行方法確認的必要手段。
特異性通常被認為是高度專一性100%的無干擾,但實際上干擾很難不存在,僅僅是因為我們對干擾的預(yù)測和認識程度的限制所至,實際檢測中我們往往會遇到各種包括迄今為止尚不知道的干擾,如果干擾物質(zhì)既不能從被分析物中分離出來,或者又不能被我們所認識的話,那么干擾就會產(chǎn)生一定的影響。根據(jù)方法原理或特性進行方法選擇性或特異性確認。分為兩種情況
當(dāng)干擾物未知時
(1)在定性檢測中,通過標記物或陽性質(zhì)控和陰性對照的方法進行確認。
(2)在定量檢測中,如果從被分析物的信號中出現(xiàn)彎曲現(xiàn)象,從而可能導(dǎo)致標準曲線的變化,影響了曲線的相關(guān)性,潛在的原因可能是有干擾物質(zhì)存在(對曲線本身是非線性的情形,可能無效)。此時應(yīng)該對方法進行擴充。
(3)在定量初篩檢測中(如GC、LC、ELISA、CHARMⅡ等),產(chǎn)生的陽性信號(陽性結(jié)果)或許被認為就是被分析物的信號。但是這個信號的產(chǎn)生到底是由于被分析物的存在,還是同時存在其他共存的干擾物質(zhì)就難于確定。此時應(yīng)該通過其他方法,如紅外、質(zhì)譜等有效方法進行確認,證明被分析物或干擾物的存在。
當(dāng)干擾物已知時
對包含多種可疑干擾物質(zhì)的樣本進行檢測分析,檢驗干擾物質(zhì)的影響,干擾物質(zhì)的存在是否會提高或者抑制被分析物的檢測和量化。如會提高或者抑制,則需對方法進行擴充。