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HM43 葡萄球菌乳膠凝集試劑盒(HM43 HKM® STAPH)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-08-04   來源:食品伙伴網(wǎng)整理   瀏覽次數(shù):188
葡萄球菌乳膠凝集檢測試劑用于確證鑒定平板上分離出的可疑金黃色葡萄球菌菌落。

一、用途

葡萄球菌乳膠凝集檢測試劑用于確證鑒定平板上分離出的可疑金黃色葡萄球菌菌落。該試劑盒僅供專業(yè)人員使用。

 

二、原理

乳膠顆粒表面包被有纖維蛋白原(與凝固酶相結(jié)合)和免疫球蛋白(與A蛋白相結(jié)合)。與金黃色葡萄球菌菌懸液混合后,乳膠顆粒可迅速凝集。缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌不會發(fā)生明顯凝集。

 

三、試劑盒組成成分 

              M43        M433   

REAG TEST 測試試劑 M43a 葡萄球菌乳膠試劑 5mL        5×5mL

乳膠顆粒包被有人類纖維蛋白原和免疫球。含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。(藍(lán)色瓶蓋)

CONTROL +  陽性對照試劑 M43b 陽性對照  1mL     2×1mL

無活性的金黃色葡萄球菌,含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。(黑色瓶蓋)

 

使用說明書

檢測板

攪拌棒

 

需要的其它材料

l  接種環(huán)

 

四、警告和注意事項(xiàng)

安全:

1、試劑僅供體外診斷使用。

2、試劑盒作防腐劑使用的疊氮化鈉可與鉛或銅制品反應(yīng)形成易爆的金屬疊氮化物?捎么罅克疀_洗以避免疊氮化物的堆積。

3、使乳膠試劑敏感的免疫球蛋白和纖維蛋白原從人類血漿中提取,經(jīng)測試不含HIV-1, HIV-2、HCV HbsAg抗體。但在使用過程中,依然應(yīng)遵循潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序。

4、在處理或檢測可疑致病菌時(shí)應(yīng)采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。含酸的廢液應(yīng)作中和處理。

5、陽性對照液在生產(chǎn)中已作惰性處理,但在使用過程中依然應(yīng)遵循潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序。

 

檢測過程:

1、試劑盒應(yīng)按說明書使用。

2、所有試劑在使用前應(yīng)達(dá)到室溫。

3、不要稀釋試劑盒內(nèi)的任何試劑。

4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。

5、不要冷凍試劑盒內(nèi)的試劑。

6、不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性對照試劑或細(xì)菌樣品。

7、注意凝集狀態(tài),呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實(shí)凝集。

8、使用前應(yīng)確保檢測板清潔干燥。

 

五、貯存及保質(zhì)期

檢測試劑盒不使用時(shí)應(yīng)貯存在28℃,并應(yīng)在包裝盒標(biāo)簽上的有效期內(nèi)使用檢測試劑。

 

六、樣本

初步分離平板,如5%的血平板,經(jīng)3537℃培養(yǎng)1824小時(shí)后,選取12個(gè)金黃色葡萄球菌的可疑菌落,菌落應(yīng)作純度測試,以減少造成錯(cuò)誤的可能性。必要時(shí),可在另一平板中劃線純化菌落。菌落形態(tài)不典型時(shí),可作革蘭氏染色以提高測試菌落為葡萄球菌的可能性。

 

七、檢測過程

質(zhì)量控制:

在每次使用檢測試劑盒前應(yīng)作下列質(zhì)量控制檢測,以確證試劑的有效性。

1、陽性對照的控制:滴1滴陽性對照試劑(M43b)于一個(gè)測試反應(yīng)環(huán)內(nèi),然后輕輕搖勻測試試劑(M43a),并滴1滴測試試劑于同一個(gè)測試反應(yīng)環(huán)內(nèi),不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性對照試劑。用攪拌棒在整個(gè)區(qū)域內(nèi)混勻液體,輕搖檢測板2分鐘后,應(yīng)觀察到凝集現(xiàn)象。如果未出現(xiàn)凝集反應(yīng),應(yīng)采用新鮮的檢測試劑盒。

2、陰性控制:滴1滴混勻的測試試劑(M43a)于反應(yīng)環(huán)內(nèi),取新鮮的已知的缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌(如表皮葡萄球菌)培養(yǎng)1824小時(shí)的單菌落,與反應(yīng)環(huán)內(nèi)的乳膠試劑混勻。搖動檢測板2分鐘,應(yīng)無凝集發(fā)生。

 

測試程序:

1、輕輕搖勻乳膠測試試劑,滴1滴測試試劑于檢測板的一個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。

2、用接種環(huán)從選擇性分離平板上挑取可疑菌落,與反應(yīng)環(huán)內(nèi)的乳膠試劑混合并混勻。用1支干凈的攪拌棒將混勻液在整個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)涂布均勻。

3、輕搖檢測板,在2分鐘內(nèi)觀察凝集結(jié)果。

4、記錄結(jié)果后,將攪拌棒和檢測板進(jìn)行適當(dāng)?shù)南咎幚怼?/span>

 

八、結(jié)果說明

2分鐘內(nèi)出現(xiàn)凝集,表明測試菌落為金黃色葡萄球菌,如不出現(xiàn)凝集,表明測試菌落即不是金黃色葡萄球菌,也不是其它具有凝固酶/A蛋白的葡萄球菌。

 

九、使用的局限性

1、結(jié)果應(yīng)依據(jù)所有的臨床或?qū)嶒?yàn)室信息進(jìn)行判斷。

2、測試應(yīng)為純菌落,如果菌落不純,可能造成錯(cuò)誤的結(jié)果。

3、培養(yǎng)超過30小時(shí)后,可能形成自凝。

4、高鹽培養(yǎng)基,如甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基,可抑制A蛋白的產(chǎn)生,可造成假陰性結(jié)果。

5、葡萄球菌的粗糙菌株可引起假陽性結(jié)果。這類菌株較少見,并且可從菌落形態(tài)上加以區(qū)別。如果可疑時(shí),可用生理鹽水制成菌懸液并仔細(xì)觀察菌懸液的流暢性。

6、纖維狀凝集可能為假陽性結(jié)果,應(yīng)作進(jìn)一步的生化鑒定。

7、有些酵母菌株可能引起假陽性凝集結(jié)果。

8、所有凝固酶陽性的葡萄球菌菌株可與葡萄球菌乳膠試劑反應(yīng)。因此金黃色葡萄球菌不易與中間葡萄球菌和豬葡萄球菌區(qū)分開。但這兩種菌株很少從人類分離出,一般在動物或腐生生物中存在。

9、乳膠凝集檢測為初步鑒定結(jié)果,所有的陽性結(jié)果的純培養(yǎng)物應(yīng)作進(jìn)一步的生化鑒定分析。

 

十、檢測效果對比

HKM® 葡萄球菌乳膠試劑盒與一種已廣泛使用的商業(yè)化的乳膠試劑盒檢測效果對比,用二種商品檢測121株金黃色葡萄球菌和其它葡萄球菌及56株潛在交叉反應(yīng)的菌株。

 

 

HKM®

總計(jì)

陽性

陰性

另一已廣泛使用的乳膠試劑盒

陽性

63

0

63

陰性

0

114

114

總計(jì)

63

114

177

靈敏度 63/63100%

特異性 114/114100%

一致性 177/177100%

63株分離菌株中,9株在2種試劑盒均存在交叉反應(yīng)。它們分別為:差異檸檬酸桿菌1株、鮑氏不動桿菌2株、斯氏普羅威登氏菌1株、蠟樣芽孢桿菌2株、產(chǎn)酸克雷伯1株、鏈球菌1株。以上所有交叉反應(yīng)的菌株中,均不會在葡萄球菌選擇性分離平板上生長或生長時(shí)菌落不會呈現(xiàn)典型的葡萄球菌菌落形態(tài)。蠟樣芽孢桿菌凝集時(shí)為非典型凝集(呈纖維狀)

 

十一、重復(fù)性

批內(nèi)重復(fù)性:通過以系列稀釋度的參照抗原和試劑盒對照抗原及一組細(xì)菌樣品對同1批產(chǎn)品的靈敏度和特異性進(jìn)行檢測。由不同的操作者隨機(jī)測試3次,最終效價(jià)由參照/對照抗原測定,并且3次定性分析結(jié)果完全一致。

批間的重復(fù)性:通過以系列稀釋度的參照抗原和試劑盒對照抗原及一組細(xì)菌樣品對3批產(chǎn)品的靈敏度和特異性進(jìn)行檢測。3個(gè)批次間,最終效價(jià)無顯著差異及定性分析結(jié)果為100%一致性。

廣東環(huán)凱微生物科技有限公司  電話:020-32077703
編輯:foodnews

 
 
  
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