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保持引物和探針的穩(wěn)定性的關(guān)鍵點

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-08-15  來源:上海撫生實業(yè)有限公司
核心提示:長期保持引物和探針的穩(wěn)定性關(guān)鍵有四點:(1)低壓凍干的引物在儲存時間和溫度方面具有更好的靈活性。引物一旦重新溶解,即應(yīng)置于

長期保持引物和探針的穩(wěn)定性關(guān)鍵有四點:

(1)低壓凍干的引物在儲存時間和溫度方面具有更好的靈活性。引物一旦重新溶解,即應(yīng)置于 -20°C 保存,且若保存時間超過一年則應(yīng)對其進(jìn)行監(jiān)測,看它是否出現(xiàn)功能下降。

(2)對于標(biāo)記的引物和探針,則應(yīng)采取措施避免標(biāo)記物暴光 (例如使用不透明管及置于暗處保存),以延長它們的使用壽命。

(3)引物濃度也可影響其穩(wěn)定性。建議引物的儲存濃度不低于10 μM;實際上,在大多數(shù)情況下,100 μM 的引物濃度操作更簡單。引物和探針還應(yīng)分裝保存,以減少凍融次數(shù),特別是標(biāo)記的引物和探針。

(4)最后,TE 緩沖液可形成比水更為穩(wěn)定的環(huán)境。此外,含有 0.1 mM EDTA的 TE 緩沖液 (標(biāo)準(zhǔn) TE 中含有 1 mM EDTA) 是一種理想的溶液,這是由于一些 PCR 反應(yīng)對 EDTA 的靈敏度可能有一些殘存。

編輯:songjiajie2010

 
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