六通閥進(jìn)樣器是高效液相色譜系統(tǒng)中最理想的進(jìn)樣器,它是由圓形密封墊(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。當(dāng)在充樣(Load)位置時,從進(jìn)樣孔充樣進(jìn)定量環(huán),多余樣品從放空孔排出;轉(zhuǎn)動至進(jìn)樣(Inject)位置時(將六通閥轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動60°),由泵輸送的流動相沖洗定量環(huán),推動樣品入柱。Rheodyne公司的六通閥進(jìn)樣器最為通用,各大HPLC儀器制造商均以此產(chǎn)品作為儀器的進(jìn)樣器。
雖然六通閥進(jìn)樣器具有結(jié)構(gòu)簡單、使用方便、壽命長、日常無需維修等特點,但正確的使用和維護(hù)將能增加使用壽命,保護(hù)周邊設(shè)備,同時增加分析準(zhǔn)確度。如使用得當(dāng)?shù)脑挘ㄩy進(jìn)樣器一般可連續(xù)進(jìn)樣3萬次而無需維修,以下淺談有關(guān)六通閥進(jìn)樣器的使用及保養(yǎng)事宜(僅供參考):
1、如果扳閥處于Load和Inject之間,便阻死了液流,壓力驟增,再轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位,過高的壓力在柱頭上引起損壞,所以應(yīng)盡快轉(zhuǎn)動閥,不能停留在中途。在HPLC系統(tǒng)中使用的注射器針頭有別于氣相色譜,是平頭注射器。一方面,針頭外側(cè)緊貼進(jìn)樣器密封管內(nèi)側(cè),密封性能好,不漏液,不引入空氣;另一方面,也防止了針頭刺壞密封組件及定子。
2、六通閥進(jìn)樣器的進(jìn)樣方式有部分裝液法和完全裝液法兩種。使用部分裝液法進(jìn)樣時,進(jìn)樣量最多為定量環(huán)體積的75%,如20μl的定量環(huán)最多進(jìn)樣15μl的樣品,并且要求每次進(jìn)樣體積準(zhǔn)確、相同;使用完全裝液法進(jìn)樣時,進(jìn)樣量最少為定量環(huán)體積的3至5倍,即20μl的定量環(huán)最少進(jìn)樣60至100μl的樣品,這樣才能完全置換樣品定量環(huán)內(nèi)殘留的溶液,達(dá)到所要求的精密度及重現(xiàn)性。推薦采用100μl的平頭進(jìn)樣針配合20μl滿環(huán)進(jìn)樣。
3、可根據(jù)進(jìn)樣體積的需要自已制作定量環(huán),一般不要求精確計算定量環(huán)的體積,譬如,一根名義上10μl的定量環(huán),實際是9μl還是10μl并不重要,因為被測樣品和校正樣品的進(jìn)樣體積保持一致,在計算結(jié)果時誤差都被抵消了。
4、進(jìn)樣樣品要求無微粒和能阻死針頭及進(jìn)樣閥的物質(zhì),樣品溶液均要用0.45μm的濾膜過濾。防止微粒阻塞進(jìn)樣閥和減少對進(jìn)樣閥的磨損。為防止緩沖鹽和其它殘留物質(zhì)留在進(jìn)樣系統(tǒng)中,每次結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣器,通常用不含鹽的稀釋劑、水或不含鹽的流動相沖洗,在進(jìn)樣閥的Load和Inject位置反復(fù)沖洗,再用無纖維紙擦凈注射器針頭的外側(cè)。