手機(jī)版
某網(wǎng)友：“由于所在實(shí)驗(yàn)室即將添置一臺(tái)新質(zhì)譜，質(zhì)譜已經(jīng)選好了，但是在液相的選擇上很是猶豫，不知是否該買一臺(tái)UPLC。因?yàn)榻?jīng)常是一次分析幾百個(gè)樣品，高速液相的速度會(huì)快一些。但是，生物樣品的前處理要求也相應(yīng)提高。而且價(jià)格也比較貴。是否需要買UPLC？還是買HPLC？想了解一下大家的使用經(jīng)驗(yàn)和看法�！毕嘈胚@是很多實(shí)驗(yàn)室小伙伴會(huì)面臨的選擇，那么到底該從哪些方面來衡量?jī)x器的選型？有人說，能用HPLC就用，多數(shù)情況下，HPLC都能hold住。UPLC肯定是大勢(shì)所趨。就像很多人所說的一樣，UPLC就像是鴉片，用過了就上癮擺脫不了。這個(gè)說法雖然極端，但是話糙理不糙，你覺得有理嗎？網(wǎng)友支招網(wǎng)友A：如你所說，使用UPLC肯定能提高你分析的速度，但是不知道目前你選好的質(zhì)譜是什么型號(hào)的？這里存在一個(gè)質(zhì)譜工作站能否兼容你的液相色譜的問題，所以還請(qǐng)考慮仔細(xì)。個(gè)人覺得UPLC類的快速液相是大勢(shì)所趨。網(wǎng)友B：個(gè)人感覺UPLC不錯(cuò)，最直觀的感覺是分析時(shí)間大大縮短，這也是UPLC鼓吹的一點(diǎn)。但UPLC對(duì)流動(dòng)相，色譜柱，樣品前處理，質(zhì)譜接口，數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)都提出了更嚴(yán)格的要求，同時(shí)帶來的液氮、乙腈等耗材的使用量下降，這個(gè)是很明顯的。至于所用的試劑、耗材等等比HPLC高級(jí)多少，我倒沒看出來。無非是要求過下0.22μm的膜。個(gè)人認(rèn)為短期內(nèi)還無法完全替代普通LC。普通液相采用細(xì)徑色譜柱是目前最成熟和經(jīng)濟(jì)的LC-MS方案。網(wǎng)友C: UPLC在分析速度、分離度等方面確實(shí)有優(yōu)勢(shì)，但對(duì)樣品的前處理、試劑等提出了更高的要求，樣品分析成本也高了。我們知道，影響分析速度快慢的主要步驟是樣本的前處理，而儀器分析速度的快慢不是主要因素，現(xiàn)在儀器都是自動(dòng)進(jìn)樣加24小時(shí)開機(jī)，測(cè)定一個(gè)樣品多花點(diǎn)時(shí)間能有多大影響，很多人那UPLC分析速度快來說事是不合適的。我的行業(yè)測(cè)定的是食品樣品，從我的經(jīng)驗(yàn)來看，我更喜歡用普通的HPLC。網(wǎng)友D：我是做中藥成分的，個(gè)人覺得還是UPLC更好一些。因?yàn)槭桥c質(zhì)譜聯(lián)用，日常分析中的樣品如果成分比較復(fù)雜的話，普通液相的色譜條件就不太好找，必然會(huì)經(jīng)常遇到需要加酸、堿或緩沖鹽的情況，尤其是緩沖鹽的選擇受質(zhì)譜的限制較大。而UPLC由于柱效高，分離效果要比普通液相高的多，在很多時(shí)候普通液相上加緩沖鹽也很難分離的成分，在UPLC上什么都不用加就可以分開，而且效果很好。所以覺得UPLC在聯(lián)用時(shí)更方便一些。網(wǎng)友E：個(gè)人認(rèn)為，如果追求分析速度的話可以選用UPLC，如果考慮的是分析成本的話，還是用HPLC。如果樣品量大，分離簡(jiǎn)單，則可以配UPLC。UPLC配質(zhì)譜的好處主要在于處理量大，不要把希望寄托在它分離效果好上。一種又快又好又穩(wěn)定的儀器太難找了。網(wǎng)友F：高通量生物分析如果樣品量大或食品類樣品比較多，建議你不要配UPLC，否則會(huì)后悔的。UPLC一般適用于研究性質(zhì)的實(shí)驗(yàn)或樣品基質(zhì)比較干凈的實(shí)驗(yàn)。網(wǎng)友G:各人覺得你要是做生物樣品或者醫(yī)藥方面的UPLC還是有優(yōu)勢(shì)的，但是你如果是做殘留分析，比如農(nóng)殘，獸殘什么的就買HPLC就好，UPLC的確是快，但是食品蔬菜什么的基質(zhì)比較復(fù)雜的你就甭想分離的很好，分離效果差很多的。網(wǎng)友H：個(gè)人意見，如果做生物樣品分析，而且每天分析樣品量比較大，不建議使用UPLC。UPLC的優(yōu)點(diǎn)是分離度高，峰形尖銳。但是其填料粒徑太小，在高通量生物分析時(shí)很容易堵柱子（UPLC柱價(jià)格比較貴），使用壽命比HPLC柱少很多。另外其峰形尖銳，與掃描型質(zhì)譜聯(lián)用會(huì)降低分析物的靈敏度。網(wǎng)友I：如果條件允許的話還是買UPLC吧，我們也是樣品量很大，如果用hplc可能的跑上一天也不一定打完全部樣品，但是用UPLC三個(gè)小時(shí)左右就能打35-40針，還能讓儀器休息一下，好好的沖洗系統(tǒng)，如果是用HPLC的話估計(jì)向我們這么大的樣品量，儀器早晚的罷工。再有就是用UPLC同時(shí)降低了開發(fā)方法的時(shí)間，提高了工作效率，同時(shí)還能省下不少的溶劑，正如waters的廣告所說的，在乙腈比較昂貴的時(shí)候確實(shí)能省不少錢，我們500ml的乙腈能走大約上百針樣品（梯度洗脫）。主要是效率高，也提高了靈敏度，峰形好，當(dāng)然儀器也貴些，好東西，貴點(diǎn)也值得，等你用熟了再用hplc，你就會(huì)感覺很不爽，原因我就不說了！就看樓主怎么權(quán)衡了！這么多網(wǎng)友支招，大家是否在面對(duì)選擇UPLC還是HPLC時(shí)，不再猶豫了，其實(shí)，選擇哪種儀器，最主要還是要看需求和預(yù)算，總的來說，HPLC相比UPLC更加經(jīng)濟(jì)，不管是儀器本身的價(jià)格，還是使用耗材的價(jià)格，而且能夠滿足多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的一般檢測(cè)需求。至于UPLC其使用體驗(yàn)的確好過HPLC，關(guān)于使用要求來說，其實(shí)沒那么多問題，只要養(yǎng)成良好的使用維護(hù)習(xí)慣，也沒啥大不了。
文章來源：網(wǎng)絡(luò)
文章來源：網(wǎng)絡(luò)
