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3M細(xì)菌總數(shù)測試片操作以及判讀

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-05-15
3M細(xì)菌總數(shù)測試片操作以及判讀

 

一、測試細(xì)菌總數(shù) 操作方法
 
1、未開封時,冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期內(nèi)用完,高溫度時,凝固水可以排除,包裝物最好于室溫啟開。 2、已開封的,將封口以膠帶封緊。
3、保存再封的袋于≤25℃(≤77℉)和溫度<50%,不要冷藏已開啟的包裝袋,并于一個月內(nèi)使用完。 4、制備1:10和更大稀釋的食物樣品稀釋液,0稱取或吸取食物樣品,置入適宜的無菌容器內(nèi),如均質(zhì)袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內(nèi).
5、加入適量的無菌稀釋液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調(diào)PH7.2) 、0.1%的蛋白膠水(ISO方法6887) 、緩沖蛋白膠水(ISO方法6579) 、鹽溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水.
不可使用含有枸櫞酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液. 因?yàn)樗鼈兡芤种咕L。
6、攪拌或均質(zhì)樣品。
樣品的稀釋液調(diào)PH6.5-7.2

對酸性樣品的稀釋液用IN NaOH
對堿性樣品用IN HCL調(diào)PH

7、將測試片置于平坦表面處,揭開上層膜。 8、使用吸管將1mL樣液垂直滴加在測試片的中央處。
9、允許使用上層膜直接落下,切勿向下滾動上層膜。 10、使用壓板隆起面底朝下,放置在上層膜中央處。
11、輕輕的壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)面積上,切勿扭轉(zhuǎn)壓板。 12、拿起壓板,靜置至少1分鐘以使培養(yǎng)基凝固。
13、測試片的透明面朝上,可堆疊至20片,對有一定濕度養(yǎng)箱能保持最少份損失是需要的。 14、可目視及用標(biāo)準(zhǔn)菌落計數(shù)器或其它的照明放大鏡計數(shù),并可參考判讀卡計算菌落數(shù)。
15、可以分離菌落作進(jìn)一步鑒定,即掀起上層膜,由培養(yǎng)膠上挑取單個菌落。  
二、測試細(xì)菌總數(shù) 判讀方法  
Aerobic bacteria count=152
測試片中含有一種紅色指示染劑可使菌落著色,計算所有紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計算之).
Count=0
在petrifilm AC測試片上,很容易解釋,圖2測試片上沒有任何菌落生長.
Count=16
圖3示有不多的菌落.
Count=143
Petrifilm AC測試片菌落數(shù)適宜計數(shù)范圍是25-250,見圖4
Count=560
測試片面積約為20cm2,當(dāng)菌落數(shù)超過250個,如圖5所示,為了估計菌落數(shù),可選擇其中一個或數(shù)個有代表性菌落的小方格(1cm2),計算平均菌落數(shù),再乘以20可得到整個測試片上的菌落數(shù)
Count=tntc(estimated count=103)
圖6所示petrifilm AC測試片上菌落太多而無法計數(shù)(tntc)
count=tntc(Estimated count=105)
有很多高數(shù)量菌落,使整個生長區(qū)變粉色,如圖7所示,你僅可在生長區(qū)邊緣現(xiàn)觀察到單個菌落,應(yīng)計錄為菌落太多無法計數(shù)(TNTC)
count=tntc(Estimated count=103)
有時菌落分布出現(xiàn)不均衡,如圖8所示,這也記錄為TNTC.
Count=tntc(Estimated count=107)
在圖9中petrifilm AC測試片上的菌落,最先粗略一看是可計數(shù)的,然而,你密切注意到生長區(qū)邊緣,能看到高密度的菌落,應(yīng)記錄為TNTC
Estimated count=160
很少數(shù)菌種會液化petrifilm AC測試片上的培養(yǎng)基,如圖10所示.若有這種現(xiàn)象發(fā)生,可選擇沒有液化區(qū)的幾個有代表性菌落的小方格(1cm2),計算平均菌落數(shù).不要計數(shù)液化區(qū)內(nèi)的紅點(diǎn).
Count=83
因?yàn)樵趐etrifilm AC測試片上菌落是紅色的,你會和不透明的不規(guī)則形狀的事物顆粒區(qū)分開,見圓圈1和2.
 
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