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現(xiàn)有各類顯微鏡使用方法及注意事項

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-04-09
核心提示: 顯微鏡是由一個透鏡或幾個透鏡的組合構(gòu)成的一種光學儀器,主要用于放大微小物體成為人的肉眼所能看到的圖像。主要包括普通
 顯微鏡是由一個透鏡或幾個透鏡的組合構(gòu)成的一種光學儀器,主要用于放大微小物體成為人的肉眼所能看到的圖像。主要包括普通光學顯微鏡、SZ61體視顯微鏡操作規(guī)程、Leica DMIL倒置熒光顯
 
顯微鏡的使用步驟及使用注意事項
一、顯微鏡的正確操作使用步驟:
1. 鏡檢前的準備。保證實驗臺面干凈整潔,顯微鏡附近不應(yīng)放置腐蝕性的試劑。
2. 調(diào)節(jié)光源。通過調(diào)節(jié)電流旋鈕來調(diào)節(jié)光照的強弱。
3. 裝置待檢玻片。將待觀察的樣品制作成臨時或永久裝片,放在載物臺上,將樣品的觀察面朝向物鏡鏡頭,將待觀察區(qū)域移至通光孔處。
4. 物鏡觀察。
應(yīng)在觀察前先調(diào)整雙筒距離,使兩眼視場合并。將低倍鏡對準通光孔,緩緩轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,將物鏡與裝片的距離調(diào)至最近。注意不要壓碎蓋玻片。通過目鏡觀察,同時用粗準焦螺旋緩慢調(diào)節(jié),直至物像出現(xiàn)。高倍鏡及更高倍下觀察,盡量用細準焦螺旋調(diào)節(jié)焦距。
油浸物鏡使用時應(yīng)使用專用鏡油。油鏡的工作距離(指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離)很短,一般在 0.2mm 以內(nèi),且一般光學顯微鏡的油浸物鏡沒有“彈簧裝置",因此使用油浸物鏡時,調(diào)焦速度必須放慢,避免壓碎玻片,并使物鏡受損。
①在低倍鏡下找到觀察目標,中、高倍鏡下逐步放大,將待觀察部位置于視野中央。
②油鏡需滴加浸油,鏡頭幾乎與標本接觸。
③從目鏡中觀察,用細準焦螺旋微調(diào),直至物象清晰。
④鏡檢結(jié)束后,將鏡頭旋離玻片,立即清潔鏡頭。一般先用擦鏡紙擦去鏡頭上的香柏油滴,再擦去殘留油跡,最后再用干凈的擦鏡紙擦凈。
5. 還原顯微鏡。關(guān)閉內(nèi)置光源及總電源。旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,使物鏡頭呈八字形位置與通光孔相對。
 
二、顯微鏡安全操作的注意事項:
1. 熟悉顯微鏡各部件性能,使用時要嚴格按步驟操作。掌握粗、細調(diào)節(jié)鈕的轉(zhuǎn)動方向與鏡筒升降關(guān)系,轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)鈕向下時,眼睛必須注視物鏡頭。
2. 使用熒光顯微鏡時,熒光汞燈不要頻繁開關(guān)。打開之后半小時之內(nèi)不要關(guān)閉,關(guān)閉后半小時不要打開。開機時注意把光強調(diào)到最小,這樣可以延長燈泡壽命。
3. 禁止隨意擰開或調(diào)換目鏡、物鏡和聚光器等零件。不要任意取下目鏡,謹防灰塵落入鏡筒。
4. 觀察帶有液體的臨時標本時要加蓋片,以免液體污染鏡頭和顯微鏡。
5. 粗、細調(diào)節(jié)旋鈕要配合使用,調(diào)節(jié)鈕不能單方向過度旋轉(zhuǎn),調(diào)節(jié)焦距時,要從側(cè)面注視鏡筒下降,以免壓壞標本和鏡頭。
6. 顯微鏡光學部件有污垢,可用擦鏡紙或綢布擦凈,切勿用手指、粗紙或手帕去擦,以防損壞鏡面。
7. 觀察完樣品后,需將物鏡擦拭干凈,特別是要將油鏡仔細擦拭干凈,以免污染鏡面。
8. 實驗完畢,要將玻片取出,將鏡頭移開,不能與通光孔相對。調(diào)高物鏡與載物臺之間的間距。關(guān)光源,保障儀器冷卻后再蓋防塵罩。長時間不用儀器要蓋防塵罩。
02
Leica DMIL倒置熒光顯微鏡操作簡易說明

 
1、 開總電源,開計算機、顯微鏡。如需熒光,開熒光電源(I/O開關(guān)按至I處)。2、 選擇物鏡,調(diào)焦獲得明場下清晰圖像。明場下用紫外激發(fā)塊!切勿觸摸激發(fā)塊鏡面,左右推動滑塊兩側(cè)即可。3、 獲得熒光圖像。如要看熒光,調(diào)節(jié)物鏡正下方激發(fā)塊,以獲得想要看的顏色。有三種激發(fā)塊可選:紫外(對應(yīng)DAPI染料,圖像呈藍色)、藍色(對應(yīng)FITC、GFP、CY3,圖像呈綠色)、綠色(對于CY5,圖像呈紅色)。
4、 點計算機桌面LAS V3.8
1) Mic1選擇相應(yīng)物鏡,變倍器為1X
2) 選擇保存位置
 

瀏覽→文件夾→路徑下選Computer,選擇存放路徑→點上方“創(chuàng)建新文件夾”圖標→重命名→點擊上方“設(shè)置攝取位置”圖標
3) 點獲取→點曝光調(diào)節(jié)→點下方獲取圖像◎ (選擇對應(yīng)物鏡,變倍器為1X)
建議參數(shù):飽和度1.5,伽馬值0.6-0.8,也可根據(jù)圖像情況自行調(diào)節(jié)
5、 采圖結(jié)束后,關(guān)熒光光源。激發(fā)塊退至明場(最右邊的),物鏡調(diào)至低倍,清理載物臺及物鏡。清理物鏡鏡頭,先用擦鏡紙包裹棉簽(光面朝外)清理表面臟物,再用擦鏡紙包裹棉簽沾無水乙醇由內(nèi)之外螺旋式擦拭物鏡。
6、 計算機上處理圖片→復制圖片到個人移用設(shè)備→關(guān)閉計算機電源
注 加標尺:處理→顯示→比例尺→模式→用戶長度(自行定義標尺長度)→合并全部
7、 檢查并填好使用記錄
03
SZ61體視顯微鏡操作規(guī)程
使用前請閱讀注意事項。
1、打開電腦、顯微鏡電源。
2、調(diào)整顯微鏡右上側(cè)的旋鈕(目鏡附近)至所需的放大倍數(shù)并記清楚。
3、調(diào)光強、焦距等,目鏡下看清圖像。
4、雙擊桌面
圖標,打開采圖軟件。
5、拉顯微鏡目鏡右側(cè)的拉桿。
6、在[文件]列表中選擇[打開設(shè)備],選擇設(shè)備,可在主窗口中預覽顯微鏡的圖像。或者點擊

可默認打開上次使用的設(shè)備,圖1-2。

7、觀察樣品前,為防止圖像失真可先調(diào)節(jié)白平衡。 
8、一鍵白平衡,能智能調(diào)節(jié)圖像的背景至純白色,并調(diào)整圖像的色彩使其接近目鏡中觀察到的效果。使用時,應(yīng)先將載物臺上的樣品移出視野外,使視野內(nèi)為純背景。然后調(diào)節(jié)顯微鏡亮度,至視野為白色或近白色,再按下左邊工具欄的[一鍵白平衡],才將樣品移回。
9、區(qū)域白平衡,無需將樣品移除視野,直接點擊[區(qū)域白平衡]按鈕后,用鼠標選取視野中的白色區(qū)域,即可達到白平衡效果。 
圖3
10、選擇自動曝光。
11、預覽分辨率設(shè)置為1024*768,抓捕分辨率為2048*1538。如圖4。
 
12、調(diào)整顯微鏡放大倍數(shù)、光強、焦距,在預覽情況下獲得最清楚的圖片。點擊拍照按鈕。
13、點擊工具欄的[保存] 按鈕,輸入保存目錄及文件名,選擇保存格式,點擊[確定]保存當前預覽圖像。
14、使用完后,將顯微鏡光源調(diào)低,關(guān)掉顯微鏡及電腦電源。清理桌面及顯微鏡。
注意事項:
1、請勿將圖片長期保存在桌面,桌面上保存的圖片將作為臨時圖片被定期清理掉,由此造成的損失概不負責。
2、如果需要加標尺,請注意抓捕分辨率應(yīng)設(shè)置為2048*1536,否則不準確。
 
編輯:songjiajie2010

 
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