一、基本原理
全自動(dòng)還原糖測(cè)定儀(SGD-Ⅳ型)是根據(jù)費(fèi)林試劑測(cè)定原理設(shè)計(jì)而成的,其原理與目前國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)一致;費(fèi)林試劑是一種氧化劑,由甲、乙液組成。測(cè)定時(shí)一定量的甲乙液混合,首先形成氫氧化銅,然后形成酒石酸鉀銅絡(luò)合物。次甲基藍(lán)作為滴定終點(diǎn)指示劑,在氧化溶液中呈藍(lán)色,被還原后呈無(wú)色。用標(biāo)準(zhǔn)還原糖滴定時(shí),還原糖首先使銅還原,至銅被還原完畢,才使次甲基藍(lán)還原成無(wú)色,即為滴定終點(diǎn)。
在滴定過(guò)程中,溶液顏色逐漸變化:藍(lán)色→深藍(lán)色→淺藍(lán)色→紫紅色→淡紫紅色→在終點(diǎn)時(shí)突然變化至無(wú)色透明。
采用光電轉(zhuǎn)換裝置,檢測(cè)滴定過(guò)程中透光率的變化(見圖一);根據(jù)電壓變化曲線由儀器控制系統(tǒng)自動(dòng)記錄、采樣、確定滴定終點(diǎn);根據(jù)達(dá)到滴定終點(diǎn)時(shí)消耗的標(biāo)準(zhǔn)還原糖量,由控制系統(tǒng)自動(dòng)計(jì)算出樣品中還原糖含量,并顯示和打印結(jié)果。
二、儀器結(jié)構(gòu)
儀器由反應(yīng)系統(tǒng)、自動(dòng)控制系統(tǒng)和機(jī)殼三部分組成。
1、反應(yīng)系統(tǒng)
核心部件為反應(yīng)池,反應(yīng)系統(tǒng)由滴定池主體構(gòu)成;滴定池左右兩側(cè)有入射光源和光電轉(zhuǎn)換器,滴定池前后兩側(cè)有液體進(jìn)出管道,滴定池內(nèi)側(cè)有溫度傳感器和液體加熱電極,根據(jù)需要調(diào)整液體溫度;滴定池底部有電磁攪拌器,使滴定液體均勻混合;上部是進(jìn)樣口,可用移液器將被測(cè)樣品注入滴定池。
2、自動(dòng)控制系統(tǒng)
包括電源電路、控制電路、控制面板、微型打印機(jī);按設(shè)定程序控制滴定池液體的進(jìn)出、液體溫度、攪拌、光電反應(yīng)信息的收集和轉(zhuǎn)換、計(jì)算、測(cè)定結(jié)果顯示及打印。注射泵自動(dòng)加入標(biāo)準(zhǔn)液、滴定液、兩個(gè)蠕動(dòng)泵可自動(dòng)完成清洗和排空。
泵管連接:
(1)清洗泵右端口連接硅膠管接蒸餾水瓶(需將該連接硅膠管置于蒸餾水中),左端口連接硅膠管接反應(yīng)池最上面不銹鋼管道(出廠時(shí)已連接上)。
(2)排空泵左端口連接硅膠管接廢液瓶(需將該連接硅膠管置于自備廢液瓶水中),右端口連接硅膠管接反應(yīng)池最下面不銹鋼管道(出廠時(shí)已連接上)。
(3)試劑泵甲、乙液注射器端口各自接相應(yīng)電磁閥的2號(hào)口連接硅膠管(出廠時(shí)已連接上),電磁閥1號(hào)口連接硅膠管接相應(yīng)甲、乙液試劑瓶(需分別將該連接硅膠管置于按說(shuō)明書配置的甲、乙液中),電磁閥3號(hào)口連接硅膠管接反應(yīng)池的甲、乙液不銹鋼管道(出廠時(shí)已連接上)。
(4)滴定泵端口接電磁閥2號(hào)口連接硅膠管,電磁閥1號(hào)口連接硅膠管接滴定糖瓶(需將該連接硅膠管置于按說(shuō)明書配置的0.7%滴定糖液中),電磁閥3號(hào)口連接硅膠管接反應(yīng)池滴定糖不銹鋼管道(出廠時(shí)已連接上)。
三、試劑配制
1、試劑名稱:
(1)硫酸銅(CuSO4•5H2O)
(2)氫氧化鈉(NaOH)
(3)酒石酸鉀鈉(C4H4O6KNa•4H2O)
(4)亞鐵氰化鉀(K4F4(CN)6•3H2O)
(5)無(wú)水葡萄糖(C6H12O6)
(6)次甲基藍(lán)(C16H18CIN3S•3H2O)
(7)蒸餾水
(8)鹽酸
2、試劑準(zhǔn)備
無(wú)水葡萄糖(C6H12O6)烘干:103℃烘3小時(shí),常溫后放干燥器儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?br />
3、試劑配制:
(1)次甲基藍(lán)容液(1.0%):
精確稱量次甲基藍(lán)10.0g,蒸餾水完全溶解后定容至1000mL,放置于棕色瓶中備用。
(2)1.00%葡萄糖溶液(定標(biāo)糖)即10.00克/升葡萄糖溶液:
精確稱量烘干無(wú)水葡萄糖10.000g,蒸餾水溶解后加入5mL鹽酸,定容至1000mL,放冰箱中備用。
(3)滴定糖溶液(0.7%):
精確稱量烘干無(wú)水葡萄糖7.0g,蒸餾水溶解后加入5.0mL鹽酸,定容至1000mL,放冰箱中備用。
(4)甲液:
精確稱量11.74g硫酸銅(CuSO4•5H2O),溶解后加入7.0mL次甲基藍(lán)容液(1.0%),定容至1000mL。
(5)乙液:
精確稱量4.70g亞鐵氰化鉀(K4F4(CN)6•3H2O),63.20g氫氧化鈉(NaOH),58.50g酒石酸鉀鈉(C4H4O6KNa•4H2O)依次溶解后定容至1000mL。
(6)特殊樣品測(cè)定時(shí),根據(jù)待測(cè)液濃度范圍,可選定經(jīng)我方技術(shù)人員確定的費(fèi)林甲乙液濃度。
四、面板
模式鍵:
待機(jī)狀態(tài)下,按【定標(biāo)】鍵定標(biāo)T2。
功能鍵:
開機(jī)(接通電源)后,每按一次【功能】鍵屏幕顯示依次顯示如下設(shè)置參數(shù)選項(xiàng):
“排空”:排空泵(1)(默認(rèn)值為11秒),設(shè)定排空泵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間。
“清洗”:清洗泵(2)(默認(rèn)值為6秒),設(shè)定清洗泵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間 。
“試劑”:試劑泵(3)(默認(rèn)值為11秒),設(shè)定試劑泵轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)間,即控制費(fèi)林試劑進(jìn)樣量。
“復(fù)位1”:試劑泵復(fù)位時(shí)間(默認(rèn)值為19秒)。
“復(fù)位2”:滴定泵復(fù)位時(shí)間(默認(rèn)值為19秒)。
“差值”:采樣電壓,根據(jù)不同的樣品選擇(默認(rèn)值為3)。
“次數(shù)”:連續(xù)測(cè)定次數(shù)(默認(rèn)值為10次)。
以上參數(shù)可滿足特殊用戶的需求設(shè)定,如設(shè)定某項(xiàng),在其顯示狀態(tài)下輸入數(shù)值(**.0)并按下輸入鍵,即完成設(shè)定,但每次開機(jī)均需重復(fù)同樣的設(shè)置。一般用戶無(wú)需設(shè)定。
打印鍵:按鍵一次取消打印功能,再按一次恢復(fù)打印功能。
清洗鍵:正在進(jìn)行滴定(反應(yīng))時(shí),按下此鍵,即可終止當(dāng)前反應(yīng),進(jìn)入排空清洗,完成后自動(dòng)進(jìn)入下一次測(cè)定。
復(fù)位1:按下此鍵,試劑泵自動(dòng)排出進(jìn)樣管道中的氣泡。如果一次沒(méi)有完成排空氣泡的話,請(qǐng)?jiān)侔匆淮卧撴I,直到管路中無(wú)氣泡為止。(注意:第一次使用時(shí),由于管路中氣泡較多,需要連續(xù)幾次操作。)
復(fù)位2:按下此鍵,滴定泵自動(dòng)排出滴定糖管道中的氣泡。一次沒(méi)有完成排空氣泡的話,請(qǐng)?jiān)侔匆淮卧撴I,直到管路中無(wú)氣泡為止。
(注意:第一次使用時(shí),由于管路中氣泡多,需要連續(xù)幾次操作。)
測(cè)定鍵:滴定反應(yīng)進(jìn)行中,液晶顯示屏上數(shù)字變化時(shí),按下此鍵,該次測(cè)定完成后自動(dòng)進(jìn)入待機(jī)狀態(tài),再次按下此鍵,又開始下一次測(cè)定。待機(jī)狀態(tài)時(shí),按下該鍵自動(dòng)進(jìn)行設(shè)定次數(shù)的測(cè)定,默認(rèn)10次(“次數(shù)”設(shè)定項(xiàng))。
開始鍵:儀器接通電源后,按下【開始】鍵,進(jìn)入完整測(cè)定程序(空白、標(biāo)定,測(cè)定)。
數(shù)字符號(hào)鍵:用于進(jìn)行參數(shù)設(shè)置時(shí)的數(shù)字輸入。
小數(shù)點(diǎn)鍵:用于進(jìn)行參數(shù)設(shè)置時(shí)的小數(shù)點(diǎn)輸入。
五、操作步驟
1、接通電源,打開儀器后部右下側(cè)的電源開關(guān),進(jìn)入待機(jī)狀態(tài)。
2、按【開始】鍵,儀器運(yùn)行。自動(dòng)進(jìn)入穩(wěn)定程序及定標(biāo)值T1(空白)、T2(標(biāo)準(zhǔn))的確定,并按照內(nèi)存設(shè)定次數(shù)(默認(rèn)值為10次)完成一組測(cè)定。
3、若特殊設(shè)置需要調(diào)整參數(shù)設(shè)定,需在打開電源開關(guān)后按【開始】鍵前,重復(fù)按壓【功能】鍵進(jìn)行各參數(shù)值設(shè)定(如不輸入?yún)?shù)值,各參數(shù)值則為儀器的初始默認(rèn)值),按【輸入】鍵完成參數(shù)設(shè)置。一般不需要重新設(shè)定參數(shù),此步驟跳過(guò)。
4、儀器打印機(jī)打印出T1值之后,需手工進(jìn)行T2值的標(biāo)定。待液晶屏顯示“定標(biāo)進(jìn)樣”時(shí),用移液器吸取500微升定標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖(1.00%即10.000克/升)溶液注入反應(yīng)池進(jìn)行定標(biāo),反應(yīng)完成后儀器自動(dòng)打印出定標(biāo)值T2。
5、T1、T2值定標(biāo)完成后,儀器自動(dòng)進(jìn)入測(cè)定程序。待液晶屏顯示“樣品進(jìn)樣”時(shí),用移液器吸取500微升待測(cè)樣品注入反應(yīng)池,儀器自動(dòng)完成樣品的測(cè)定,計(jì)算并打印出測(cè)定結(jié)果。
6、一組樣品(按“次數(shù)”顯示設(shè)定的測(cè)定次數(shù),不進(jìn)行設(shè)定儀器按默認(rèn)值為10次)測(cè)定完成后,儀器進(jìn)入待機(jī)狀態(tài)。如需繼續(xù)測(cè)定,直接按【測(cè)定】鍵,進(jìn)入下一個(gè)設(shè)定次數(shù)的測(cè)定循環(huán)(如不設(shè)定,儀器按默認(rèn)值為10次)。
特別提示:測(cè)定過(guò)程中如果需要暫停,可在滴定過(guò)程中(液晶顯示屏?xí)r間數(shù)字跳動(dòng)時(shí))按下【測(cè)定】鍵,該次測(cè)定完成后,自動(dòng)停機(jī);再次測(cè)定只需按下【測(cè)定】鍵,可繼續(xù)本輪次測(cè)定,無(wú)需重新定標(biāo)。
7、待機(jī)狀態(tài)下關(guān)閉電源開關(guān),即可關(guān)機(jī)。
8、特殊操作說(shuō)明:
(1)滴定過(guò)程中(顯示屏?xí)r間數(shù)字跳動(dòng)時(shí)),按下【清洗】鍵,即可結(jié)束該次測(cè)定,儀器不打印測(cè)定結(jié)果,自動(dòng)重復(fù)本次操作。
(2)重新定標(biāo)T2值。在儀器一組測(cè)定循環(huán)完成后的待機(jī)狀態(tài)下,按下【定標(biāo)】鍵,根據(jù)液晶屏顯示“定標(biāo)進(jìn)樣”提示時(shí),注入500微升定標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖(1.00%即10.00克/升)溶液,儀器自動(dòng)完成定標(biāo)并重新打印T2值。再次按下【測(cè)定】鍵,則按照重新定標(biāo)的T2值完成下一組測(cè)定。
(3)重新定標(biāo)T1值。T1值不能單獨(dú)定標(biāo),如需要重新定標(biāo)T1值,須在待機(jī)狀態(tài)下,按【開始】鍵完成T1、T2值定標(biāo)并進(jìn)入常規(guī)測(cè)定程序。
六、注意事項(xiàng)
1、儀器使用穩(wěn)壓電源。
2、儀器使用兩周后反應(yīng)池要清洗,用清洗液浸泡二分鐘,再用注射器排出。
3、謹(jǐn)防反應(yīng)液濺出。
4、反應(yīng)池裝好后請(qǐng)勿隨便轉(zhuǎn)動(dòng)反應(yīng)池左右兩側(cè)耳朵,謹(jǐn)防漏液。
5、正確使用移液器。
6、儀器長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),排除管道中的試劑,注入蒸餾水。
七、常見問(wèn)題及處理措施
出現(xiàn)問(wèn)題
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檢查項(xiàng)目
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處理措施
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開機(jī)無(wú)反應(yīng)
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檢查電源線、
保險(xiǎn)管
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連接好電源線,
保持保險(xiǎn)管完好。
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反應(yīng)池加熱不停
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檢查溫度控制器、反應(yīng)池右耳、攪拌轉(zhuǎn)子
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連接好溫度控制器插頭、反應(yīng)池右耳旋緊
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反應(yīng)時(shí)間顯示為99秒
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檢查甲乙液、注射器、連接管道、攪拌轉(zhuǎn)子、加熱溫度、發(fā)光二極管亮度是否正常,觀察滴定是否到終點(diǎn)
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保持試劑瓶液面高度,注射器、管道內(nèi)無(wú)氣泡、破損、適當(dāng)調(diào)整試劑濃度
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測(cè)定值漂移
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檢查注射器、連接管道,攪拌轉(zhuǎn)子、光源、電磁閥、加熱溫度、反應(yīng)池進(jìn)出口堵塞
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保持注射器、連接管道無(wú)氣泡、破損,攪拌轉(zhuǎn)子、光源工作正常。更換電磁閥,疏
通進(jìn)出口
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打印機(jī)不走紙
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檢查打印機(jī)、打印紙
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更換打印紙
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