液相色譜儀操作起來不算難,就算是剛接觸儀器的小白,認真學習兩天基本可以上手。但這只是假象,要想用好液相可不容易,它超級敏感和細膩,一不小心就堵塞壓力過高或有氣泡沒有壓力。所以日常的準備工作和使用過程中的繁瑣的操作都要知道,不可缺少。下面跟著小編來看看哪些事情堅決不能做!
泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),最終產(chǎn)生漏液。
流動相不抽濾超聲
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內(nèi)抽濾,可采用水系濾膜(0.22μm或0.45μm)等濾器,然后超聲15min以上去除液體當中的微小氣泡。泵的入口都應連接砂濾棒(或片),輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換。
儀器運行之前沒有排氣泡
液相最害怕進入氣泡,不僅影響泵的正常運轉,進入色譜柱后,還會影響流動相的流速和流量,引起基線的起伏不穩(wěn)定。因此液體進入儲液瓶之前得排氣泡,上機之后也得排氣泡才能正常運行進入色譜柱。
使用后沒有及時清洗泵
流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內(nèi),尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內(nèi),由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
流動相走空