紫外可見分光光度計是實驗室普及率最高的一類光譜儀器。由于靈敏度高、選擇性好、準確度高、適用濃度范圍廣,最重要是分析成本低、操作簡便、快速。因此,長期在分析領域扮演很重要的角色。但是經常會有用戶因更換光源而煩惱,每次數據有差別,都覺得是光源惹的禍,本文主要解析光源壽命的一些問題,并附上紫外分光度計使用故障排除方法總結。
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在紫外可見分光光度計中,常用光源分兩類,熱輻射光源和氣體放電光源。
熱輻射光源用于可見光區(qū),如鎢燈和鹵鎢燈;氣體放電光源用于紫外光驅,如氫燈和氘燈。
02
常用光源:氘燈、鎢燈壽命
一般儀器在開機初始化時氘燈和鎢燈均點亮,隨即可以根據程序控制來關閉不使用的那只光源。例如測試紫外區(qū)時則可關閉鎢燈;反之關閉氘燈。這樣就延長了那只不使用的光源燈的壽命,同時還可以減少不必要的光譜或光噪聲的干擾,可謂一舉兩得。
至于光源燈的壽命這是一個老話題了,其中的因素太多了。如:使用次數、開啟關閉頻率(尤其對氘燈而言)、環(huán)境溫度、燈的質量、外電網電壓的穩(wěn)定程度、供電電路的穩(wěn)定度、使用間隔等等。
03
紫外可見分光光度計常見故障的排除
一.光源部分
(1)故障:氘燈不亮
原因:氘燈壽命到期(此種原因幾率最高);
檢查:燈絲電壓、陽極電壓均有,燈絲也可能未斷(可看到燈絲發(fā)紅);
處置:更換氘燈。
(2)故障:鎢燈不亮
原因:鎢燈燈絲燒斷(此種原因幾率最高);
檢查:鎢燈兩端有工作電壓,但燈不亮;取下鎢燈用萬用表電阻檔檢測;
處置:更換新鎢燈。
(3)故障:鎢燈不亮
原因:沒有點燈電壓;
檢查:保險絲被熔斷;
處置:更換保險絲(如更換后再次燒斷則要檢查供電電路)。
(4)故障:氘燈不亮
原因:氘燈起輝電路故障;
檢查:氘燈在起輝的過程中,一般是燈絲先要預熱數秒鐘,然后燈的陽極與陰極間才可起輝放電,如果燈在起輝的開始瞬間燈內閃動一下或連續(xù)閃動,并且更換新的氘燈后依然如此,有可能是起輝電路有故障,燈電流調整用的大功率晶體管損壞的幾率最大。
處置:需要專業(yè)人士修理。
二.信號部分
(1)故障:吸光值結果出現(xiàn)負值(最常見)
原因:沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液;
檢查:將參比液與樣品液調換位置便知;
處置:做空白記憶、調換參比液或用參比液配置樣品溶液。
(2)故障:樣品室內無任何物品的情況下,全波長范圍內基線噪聲大
原因:光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品;
檢查:觀察光源是否照射到入射狹縫的中央,石英窗上有無污染物;
處置:重新調整光源鏡的位置,用乙醇清洗石英窗。
(3)故障:信號的分辨率不夠,具體表現(xiàn)是:本應疊加在某一大峰上的小峰無法觀察到
原因:狹縫設置過窄而掃描速度過快,造成檢測器響應速度跟不上,從而失去應測到的信號;按常理,一定的狹縫寬度要對應一定范圍的掃描速度;或者狹縫設置得過寬,使儀器的分辨率下降,將小峰融合在大峰里了;
檢查:放慢掃描速度看一看或將狹縫設窄;
處置:將掃描速度、狹縫寬窄、時間常數三者擬合成一個最優(yōu)化的條件。
(4)故障:樣品室內無任何物品的情況下,僅僅是紫外區(qū)的基線噪聲大
原因:氘燈老化、光學系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結晶物;
檢查:可見區(qū)的基線較為平坦,斷電后打開儀器的單色器及上蓋,肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面;如果光學系統(tǒng)正常,最大的可能是氘燈老化,可以通過能量檢查或更換新燈方法加以判斷;
處置:更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意:此種技巧需要有一定維修經驗者來實施)。
(5)故障:樣品出峰位置不對
原因:波長傳動機構產生位移;
檢查:通過氘燈的656.1nm的特征譜線來判斷波長是否準確;
處置:對于高檔儀器而言處理手段相對簡單,使用儀器固有的自動校正功能即可;而對于相對簡單的儀器,這種調整則需要專業(yè)人員來進行了;清洗比色皿,更換空白溶液。
(6)故障:樣品信號重現(xiàn)性不良
原因:排除儀器本身的原因外,最大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復推拉不在同一個位置上;
檢查:更換一種穩(wěn)定的試樣判定;
處置:采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠。
(7)故障:做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個大的負脈沖
原因:掃描速度設置得過快,信號在讀取時,誤將濾光片或光源鏡的切換當做信號讀取了。
(8)故障:沒有任何檢測信號輸出
原因:沒有任何光束照射到樣品室內;
檢查:將波長設定為530nm,狹縫盡量開到最寬檔位,在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處,觀察白紙上有無綠光斑影像;
處置:檢查光源鏡是否轉到位,雙光束儀器的切光電機是否轉動了(耳朵可以聽見電機轉動的聲音);
檢查:改變掃描速度。
(9)故障:做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個長時間段的負值或滿屏大噪聲
原因:濾光片飼服電機“失步”,造成檔位錯位,國產電機尤甚;
檢查:重新開機有可能恢復,或打開單色器對照波長與濾光片的相對位置來檢查(注意:打開單色器時要保護檢測器不被強光刺激)。
(10)故障:當儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉換為按鍵開關式的簡易儀器
原因:開關觸點因長期氧化所致造成接觸不良;
檢查:用手加重力量按琴鍵時,吸光值隨之變化;
處置:用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可。
(11)故障:樣品室放入空白后做基線記憶,噪聲較大,紫外區(qū)尤甚
原因:比色皿表面或內壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對紫外光譜的吸收太強烈,使放大器超出了校正范圍;
檢查:將波長設定為250nm,先在不放任何物品的狀態(tài)下調零,然后將空比色皿插入樣品道一側,此時吸光值應小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿;同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大;
處置:更換飼服電機。
(12)故障:儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上
原因:在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良;
處置:更換電位器。