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微生物接種培養(yǎng)的最全解讀,最后幾條很重要!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-05-17
核心提示:一、常見培養(yǎng)基及其臨床應(yīng)用【A】血平板:即血瓊脂平板培養(yǎng)基,主要成分包括脫脂羊血、蛋白胨、牛肉粉、氯化鈉。羊血一方面提供一
一、常見培養(yǎng)基及其臨床應(yīng)用

【A】血平板:即血瓊脂平板培養(yǎng)基,主要成分包括脫脂羊血、蛋白胨、牛肉粉、氯化鈉。羊血一方面提供一些特殊生長(zhǎng)因子,另一方面用于溶血反應(yīng)的觀察。

【B】麥康凱平板:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基簡(jiǎn)稱MAC培養(yǎng)基。主要成分包括蛋白胨、膽鹽、氯化鈉、乳糖、中性紅,MAC為一種選擇性培養(yǎng)基其原理是:膽鹽可以抑制革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng),對(duì)傷寒等沙門菌的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。中性紅可以把能分解乳糖和不分解乳糖的細(xì)菌區(qū)分開,而呈現(xiàn)不同顏色。沙門菌及志賀菌呈無色菌落,大腸埃希菌呈桃紅色菌落。不過麥康凱瓊脂為一種弱選擇性的培養(yǎng)基,一些其他的細(xì)菌也能在上面生長(zhǎng)。

【C】不加萬古霉素巧克力平板:主要成分包括哥倫比亞血瓊脂、無菌羊血。當(dāng)培養(yǎng)基加熱至80-90℃時(shí),可使紅細(xì)胞破裂,以利于嗜血桿菌、奈瑟菌的生長(zhǎng)。

【C+】加萬古霉素巧克力平板:巧克力平板基礎(chǔ)上添加萬古霉素,可抑制絕大部分革蘭陽性球菌。

【D】沙保弱平板:主要成分包括蛋白胨、葡萄糖、瓊脂粉、氯霉素。真菌對(duì)培養(yǎng)基營養(yǎng)要求不高,在高濃度葡萄糖、麥芽糖、淀粉和酸性條件下即可生長(zhǎng)繁殖。

淋球菌平板:主要組成成分包括特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸氫鉀、瓊脂。

堿性蛋白胨水:主要成分為蛋白胨、氯化鈉。蛋白胨提供碳氮源,較高的pH抑制腸道菌群生長(zhǎng),利于霍亂弧菌的生長(zhǎng),高濃度氯化鈉滿足弧菌嗜鹽生長(zhǎng)的需要。

SS平板:主要成分為牛肉粉、蛋白胨、乳糖、膽鹽、檸檬酸鈉、硫代硫酸鐵、檸檬酸鐵、煌綠、苯酚紅。

羅氏固體培養(yǎng)基:主要成分包括蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機(jī)鹽和孔雀綠等?兹妇G可抑制雜菌生長(zhǎng),蛋黃含脂質(zhì)生長(zhǎng)因子,能刺激生長(zhǎng)。
 

二、如何選擇培養(yǎng)基


三、如何接種標(biāo)本

四、如何選擇培養(yǎng)條件


五、關(guān)于接種培養(yǎng)的常見問題


Q:送過培養(yǎng)組合(一般細(xì)菌+真菌培養(yǎng)),能延長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行結(jié)核桿菌培養(yǎng)嗎?

A:不能。一般細(xì)菌培養(yǎng)+真菌培養(yǎng)僅接種常規(guī)的血平板麥康凱巧克力等培養(yǎng)基+沙保弱培養(yǎng)基,結(jié)核分枝桿菌需要專門的羅氏固體培養(yǎng)基或分枝桿菌液體培養(yǎng)基,雖然二者培養(yǎng)溫度相同,但營養(yǎng)條件不同,即使延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間,也無法保證結(jié)核分枝桿菌的生長(zhǎng)。

Q:尿培養(yǎng)能用尿常規(guī)管送檢嗎?大便培養(yǎng)能用大便常規(guī)管送檢嗎?

A:不能。所有培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)使用無菌容器以避免細(xì)菌污染,尿培養(yǎng)或大便培養(yǎng)應(yīng)使用專用的無菌痰杯或無菌拭子送檢。

Q:經(jīng)過PCR檢測(cè)使用后的標(biāo)本,能拿來做培養(yǎng)嗎?

A:不能。建議1份標(biāo)本貼1個(gè)條碼,如標(biāo)本量少或?qū)嵲陔y以取材需要共用標(biāo)本,應(yīng)優(yōu)先進(jìn)行微生物培養(yǎng)。因經(jīng)過其他項(xiàng)目檢測(cè)處理后的樣本可能會(huì)被污染或?qū)⒃械募?xì)菌/真菌滅活,導(dǎo)致培養(yǎng)結(jié)果的假陽性或假陰性。且實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本應(yīng)保存一段時(shí)間以備復(fù)查,共用標(biāo)本后可能導(dǎo)致標(biāo)本無法復(fù)查,建議盡量不要共用標(biāo)本。

Q:為什么送檢培養(yǎng)組合(一般細(xì)菌+真菌培養(yǎng))一定要備注標(biāo)本類型?

A:雖然培養(yǎng)目的相同(一般細(xì)菌+真菌),但不同標(biāo)本類型對(duì)應(yīng)接種的培養(yǎng)基、培養(yǎng)技術(shù)不同,且不同標(biāo)本類型(如無菌部位VS有菌部位)在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)結(jié)果的解讀不同,導(dǎo)致無法進(jìn)行接種或結(jié)果報(bào)告。


參考文獻(xiàn):
[1] WS/T 805—2022臨床微生物檢驗(yàn)基本技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)
[2] WS/T 497—2017侵襲性真菌病臨床實(shí)驗(yàn)室診斷操作指南
本文結(jié)合了相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及本實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范。 
編輯:songjiajie2010

 
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