培養(yǎng)基(culture medium)是由人工方法配制而成的,專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品。培養(yǎng)基一般pH為7.2~7.6,少數(shù)的細菌按生長要求調(diào)整pH偏酸或偏堿。許多細菌在代謝過程中分解糖類產(chǎn)酸,故常在培養(yǎng)基中加入緩沖劑,以保持穩(wěn)定的pH。培養(yǎng)基制成后必須經(jīng)滅菌處理。
培養(yǎng)基按其營養(yǎng)組成和用途不同,分為以下幾類:
1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基
基礎(chǔ)培養(yǎng)基(basic medium)含有多數(shù)細菌生長繁殖所需的基本營養(yǎng)成分。它是配制特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ),也可作為一般培養(yǎng)基用。如營養(yǎng)肉湯(nutrient broth)、營養(yǎng)瓊脂(nutrient agar)、蛋白胨水等。
2.增菌培養(yǎng)基
若了解某種細菌的特殊營養(yǎng)要求,可配制出適合這種細菌而不適合其他細菌生長的增菌培養(yǎng)基(enrichment medium)在這種培養(yǎng)基上生長的是營養(yǎng)要求相同的細菌群。它包括通用增菌培養(yǎng)基和專用增菌培養(yǎng)基,前者為基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加合適的生長因子或微量元素等,以促使某些特殊細菌生長繁殖,例如鏈球菌、肺炎鏈球菌需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長;后者又稱為選擇性增菌培養(yǎng)基,即除固有的營養(yǎng)成分外,再添加特殊抑制劑,有利于目的菌的生長繁殖,如堿性蛋白胨水用于霍亂弧菌的增菌培養(yǎng)。
3.選擇培養(yǎng)基
在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),使之抑制某些細菌生長,而有利于另一些細菌生長,從而將后者從混雜的標本中分離出來,這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基(selective medium)。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌和志賀菌容易分離到。若在培養(yǎng)基中加入抗生素,也可起到選擇作用。實際上有些選擇培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基之間的界限并不十分嚴格。
4.鑒別培養(yǎng)基
用于培養(yǎng)和區(qū)分不同細菌種類的培養(yǎng)基稱為鑒別培養(yǎng)基(differential medium)。利用各種細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,一般不加抑菌劑,觀察細菌在其中生長后對底物的作用如何,從而鑒別細菌。如常用的糖發(fā)酵管、三糖鐵培養(yǎng)基伊紅-亞甲藍瓊脂等。也有一些培養(yǎng)基將選擇和鑒別功能結(jié)合在一起,在選擇的同時,起一定的鑒別作用,如SS瓊脂,其中所加的底物乳糖和指示劑中性紅就起到鑒別作用。
5.厭氧培養(yǎng)基
專供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別用的培養(yǎng)基,稱為厭氧培養(yǎng)基(anaerobic medium)。這種培養(yǎng)基營養(yǎng)成分豐富,含有特殊生長因子,氧化還原電勢低,并加入亞甲藍作為氧化還原指示劑。其中心腦浸液和肝塊、肉渣含有不飽和脂肪酸,能吸收培養(yǎng)基中的氧;硫乙醇酸鹽和半胱氨酸是較強的還原劑;維生素K氯化血紅素可以促進某些類桿菌的生長。常用的有庖肉培養(yǎng)基(cooked meat medium)硫乙醇酸鹽肉湯等,并在液體培養(yǎng)基表面加入凡士林或液狀石蠟以隔絕空氣。
此外,還可根據(jù)對培養(yǎng)基成分了解的程度將其分為兩大類:化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基(defined medium),又稱為合成培養(yǎng)基(synthetic medium);化學(xué)成分不確定的培養(yǎng)基(undefined medium),又稱天然培養(yǎng)基(complex medium)也可根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)的不同分為液體、固體和半固體培養(yǎng)基三大類。在液體培養(yǎng)基中加入15g/L的瓊脂粉,凝固成固體培養(yǎng)基;瓊脂粉含量在3~5g/L時,則為半固體培養(yǎng)基。瓊脂在培養(yǎng)基中起賦形劑作用不具營養(yǎng)意義。液體培養(yǎng)基可用于大量繁殖細菌,但必須種入純種細菌;固體培養(yǎng)基常用于細菌的分離和純化;半固體培養(yǎng)基則用于觀察細菌的動力和短期保存細菌。
——《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》第9版