AMAMFSAc05024  奶油  巧克力  果糖  葡萄糖  乳糖  麥牙糖  蔗糖  液相色譜法

AM-AM-FS-Ac-05024

奶油巧克力中果糖、葡萄糖、乳糖、麥牙糖和蔗糖

1.儀器和試劑
1.1 儀器
(a)液相色譜儀——帶有M600OA型泵，R401型折射率檢測儀或相當?shù)膬x器，及10mV記錄儀。
(b)柱填充物碳水化合物柱，300×4mm(內(nèi)徑)。
柱子必須符合以下標準:
對果糖的容量因子=K′=（tR－to）/to≥5其中tR=果糖的保留時間=從進樣到出現(xiàn)最大峰高的時間;to=溶劑的保留時間=從溶劑進樣到出現(xiàn)第一個基線變形的最大峰高或溶劑峰。
分辨因子(兩個譜帶中心之間的距離除以平均譜帶寬度=Rs=（t2－t1）/0.5（tw1+tw2），其中t1和t2分別為從進樣到第二峰(萄萄糖)出現(xiàn)最大峰高和第一峰(果糖)出現(xiàn)最大峰高的時間;tw！和tw2分別為第一和第二峰的基線寬度(以時間單位計)。對果糖:葡萄糖的比率為2.0—0.5，Rs≥1.0;對于比率≥2的，Rs≥1.25。
當任一個或兩個標準不符時，則換柱子。
(c)進樣閥——7120LC型帶有50μl環(huán)的進樣器，或同類產(chǎn)品。
(d)輔助設備——Bransonic12型超聲浴或同類儀器，用以溶劑脫氣；攪拌器；溶劑純化過濾裝置。
1.2 試劑
(a)糖的標準溶液——濃度為10μg/ml。真空條件下在60℃分別干燥糖的標準物(果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、麥牙糖)12h。將其溶于水中并逐次稀釋到濃度為10μg/ml。當日制備。
(b)流動相——CH3CN十H2O(經(jīng)活性炭過濾)(80+20)。通過WhatmanGF/F0.7μm玻璃纖維漏斗過濾，使用前在超聲浴上脫氣。
2.試驗過程
2.1.樣品的制備
稱量10.0g細碎的奶油巧克力，放入≥100ml的離心瓶中，并加入50ml石油醚。在大約每分鐘1800轉(zhuǎn)下離心約15min。傾潷去上層清液，再萃取。
用玻璃棒研碎殘留物，加入100g H2O，并稱重。放在85-90℃水浴上加熱25min。冷卻至室溫，加水至原重量。在每分鐘2000轉(zhuǎn)下離心10min，吸取上層清液，并用0.45μm Swinney注射過濾器過濾。
2.2.測定
    用50μL進樣環(huán)吸滿樣品溶液，注入帶有流動溶劑的柱子，流動溶劑流速為1.5—2.0ml/min。將每種糖的樣品的峰高或峰面積與相應的標準峰高或峰面積相比較來計算每種糖的濃度。全部都使用同種方法測定 (面積或高度)。
3.來源
AOAC 官方方法980.13第17版

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