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克隆嵌板法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06
克隆嵌板法(clone panel method)是應(yīng)用雜種細(xì)胞保留或丟失人染色體有時(shí)有重疊現(xiàn)象而設(shè)計(jì)的一種簡(jiǎn)便有用的基因定位方法。如果某一表型特征只出現(xiàn)于克隆A、C而不見(jiàn)于B,就可決定該特征的基因只能在3號(hào)染色體上,因?yàn)锳、C克隆都有3號(hào)染色體,而B(niǎo)克隆則無(wú),其它亦可同理判斷這樣3個(gè)克隆可對(duì)8條(23=8)染色體作出判斷;如果是5個(gè)克。25=32)就可對(duì)人類22條常染色體和2條性染色體作出判斷。例如半乳糖激酶(GK)、尿苷-磷酸激酶(UMPK)和氨基已糖苷酶A(HEXA)的基因就是用此法分別定位于人的17號(hào)、1號(hào)和15號(hào)染色體上的。此外,還可對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行特殊染色,來(lái)識(shí)別雜種細(xì)胞中人和鼠染色體,以助基因定位。在體細(xì)胞雜交基礎(chǔ)上還發(fā)展了微細(xì)胞(micro cell)技術(shù),即制備只含少數(shù)或一條人染色體的微細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞雜交。也可將人中期染色體進(jìn)行分離直接轉(zhuǎn)移到鼠類細(xì)胞中,使人染色體在受體細(xì)胞中裂解變成短的DNA片段,并整合到受體細(xì)胞的基因組中。如兩個(gè)基因同時(shí)整合進(jìn)去,就證明它們的緊密連鎖關(guān)系。
 

 

 
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