国产黄片无马赛克在线观看_国产成人在线播放_国产综合A级片视频_亚洲va无码va亚洲

VIP標(biāo)識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設(shè)為首頁| 加入桌面| | 手機(jī)版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號
 

基因拼接SDL法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
SDL方法(Gene splicing by directed liga- tion),即直接拼接法,在SOE法基礎(chǔ)上又有新的突破:
 。1)限制性內(nèi)切酶,EcoRI核酸內(nèi)切酶(或其它Ⅱs類限制性內(nèi)切酶)能專一性識別 6bp的非回文序列,并能單向特異性地切斷EcoRI識別的6bp以外的1—5個核苷酸,產(chǎn) 生一個以突出的4個核苷酸為結(jié)尾的5'末端。因而該伸頭末端與酶切位點序列無關(guān), 而是由切點附近的序列決定的。
  (2)擴(kuò)增時實際運用的引物的構(gòu)建。以exon5的實用引物為例:5'鏈引物包括常規(guī)5' 鏈引物序列和BamHI識別位點及起密碼序列;3'鏈引物包括常規(guī)3'鏈引物和AC及EcoRI 識別位點。
 。3)唯一性末端的形成。經(jīng)擴(kuò)增和限制性內(nèi)切酶處理后可得供拼接的exon5,它的右 側(cè)突出末端TCAC中,TC為原始exon5的一部分,AC為原始exon6的一部分,且TCAC與 exon6的AGTG互補(bǔ)配對,其余類推。因為這種結(jié)尾相同的幾率為1/259,故可被視作 “唯一性末端”。
  (4)把經(jīng)擴(kuò)增的exon5、exon6和exon7混合,依據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則,它們就能按順 序依次拼接。
 

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.695 second(s), 1248 queries, Memory 3.55 M