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免疫PCR

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
免疫-PCR(immuno-PCR)是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統(tǒng).它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原,尤其適用于極微量抗原的檢測.
  免疫-PCR試驗的主要步驟有三個:①抗原-抗體反應,②與嵌合連接分子結合,③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA).該技術的關鍵環(huán)節(jié)是嵌合連接分子的制備.在免疫-PCR中,嵌合連接分子起著橋梁作用,它有兩個結合位點,一個與抗原抗體復合物中的抗體結合,一個與質粒DNA結合,其基本原理與ELISA和免疫酶染色相似,不同之處在于其中的標記物不是酶而是質粒DNA,在操作反應中形成抗原抗體-連接分子-DNA復合物,通過PCR擴增DNA來判斷是否存在特異性抗原.
  免疫PCR優(yōu)點為:①特異性較強,因為它建立在抗原抗體特異性反應的基礎上.②敏感度高,PCR具有驚人的擴增能力,免疫PCR比ELISA敏感度高105倍以上,可用于單個抗原的檢測.③操作簡便,PCR擴增質粒DNA比擴增靶基因容易得多,一般實驗室均能進行.
 

 

 
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