成分
蛋白胨 10g
氯化鈉 5g
磷酸二氫鉀 0.225g
磷酸氫二鈉 5.64g
蒸餾水 1000mL
0.5%氰化鉀溶液 20mL
pH7.6
制法
將除氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min。放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻。每100mL培養(yǎng)基加入0.5%氰化鉀溶液2.0mL(最后濃度為1∶10000),分裝于12mm×100mm滅菌試管,每管約4mL,立刻用滅菌橡皮塞塞緊,放在4℃冰箱內(nèi),至少可保存兩個月。同時,將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基,分裝試管備用。
試驗方法
將瓊脂培養(yǎng)物接種于蛋白胨水內(nèi)成為稀釋菌液,挑取1環(huán)接種于氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基。并另挑取1環(huán)接種于對照培養(yǎng)基。在36±1℃培養(yǎng)1~2d,觀察結果。如有細菌生長即為陽性(不抑制),經(jīng)2d細菌不生長為陰性(抑制)。
注:氰化鉀是劇毒藥物,使用時應小心,切勿沾染,以免中毒。夏天分裝培養(yǎng)基應在冰箱內(nèi)進行。試驗失敗的主要原因是封口不嚴,氰化鉀逐漸分解,產(chǎn)生氫氰酸氣體逸出,以致藥物濃度降低,細菌生長,因而造成假陽性反應。試驗時對每一環(huán)節(jié)都要特別注意。