80年代中期,Georgep.s在前人對(duì)絲狀噬菌體分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)上首先提出了噬菌體展示技術(shù)。其基本原理是將外源DNA片段插入噬菌體編碼蛋白基因PⅢ或PⅥ中,使外源DNA片段對(duì)應(yīng)的表達(dá)產(chǎn)物融合在噬菌體的外殼蛋白中形成融合蛋白,呈現(xiàn)在噬菌體表面。該技術(shù)將蛋白質(zhì)分子的表型和基因型巧妙地結(jié)合于絲狀噬菌體這樣一個(gè)便于對(duì)其進(jìn)行一系列生化和遺傳操作的載體上,從而大大簡(jiǎn)化了蛋白質(zhì)分子表達(dá)文庫(kù)的篩選和鑒定。
噬菌體肽庫(kù)是噬菌體展示技術(shù)的一個(gè)非常重要的分支。肽庫(kù)是由大量帶有不同肽段的單個(gè)噬菌體組成的重組噬菌體庫(kù)。通過(guò)目標(biāo)受體來(lái)篩選與其相互作用的噬菌體肽,經(jīng)過(guò)洗脫、擴(kuò)增,從而富集到特異性的重組噬菌體,并分析所篩選到的肽的結(jié)構(gòu)和序列,為蛋白質(zhì)分子之間(如抗原與抗體、受體與配體、酶與底物)的相互作用機(jī)理提供理論依據(jù)。隨著噬菌體肽庫(kù)技術(shù)應(yīng)用越來(lái)越廣,其技術(shù)也得到了充分發(fā)展。
噬菌體肽庫(kù)的基本原理是將隨機(jī)肽段插入到噬菌體衣殼蛋白上形成融合蛋白而展示出來(lái),并利用噬菌體能大量復(fù)制的特點(diǎn),得到不同重組噬菌體的多拷貝,為不同的研究提供有利的工具。
噬菌體肽庫(kù)技術(shù)應(yīng)用范圍很廣,可用于表位的確定、描述蛋白之間的作用、確定非蛋白配體的蛋白模擬表位、受體的活性作用分子篩選、酶底物的確立、分析DNA結(jié)合蛋白等,隨著生物技術(shù)的發(fā)展,其應(yīng)用領(lǐng)域也越來(lái)越廣。