（一）材料與試劑

1．新城疫滅活油佐劑苗

2．患傳染性法氏囊炎的法氏囊組織

3．傳染性法氏囊炎弱毒苗

4．健康產(chǎn)卵雞群

5．新城疫血凝抗原

6．傳染性法氏囊炎瓊擴(kuò)抗原

7．其它

（二）操作方法

1．傳染性法氏囊炎組織滅活苗的制備 將有病變的法氏囊組織稱重，以組織搗碎器搗成勻漿，按1︰5（重量︰體積）加滅菌生理鹽水，繼續(xù)搗勻，然后用5層滅菌紗布過(guò)濾，加入0.30％的甲醛，混勻，37℃感作24h，中間振蕩數(shù)次。滅活后，以常規(guī)培養(yǎng)基進(jìn)行雜菌檢查，以小白鼠進(jìn)行安全檢查，合格后，置陰涼處備用。

2．傳染性法氏囊炎滅活油佐劑組織苗的制備 將10號(hào)白油按2％加硬脂酸鋁粉和6％的司本－80混合加熱融化后，分裝保存。滅活組織液以4％比例加入吐溫80，以油相︰水相＝3︰1的劑量制成滅活油佐劑組織苗。先將油相攪拌起來(lái)，逐漸加入水相，充分?jǐn)嚢杓纯伞?/p>

3．選取健康無(wú)主要傳染病，特別是無(wú)雞白痢、沙門(mén)氏菌病的高產(chǎn)雞群。

4．將雞新城疫滅活油佐劑苗與傳染性法氏囊炎滅活油佐劑組織苗等量混合，給每只雞皮下注射2ml。

5．14天后，從雞翅靜脈采血，采集血清做雞新城疫血凝抑制試驗(yàn)和傳染性法氏囊瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。血凝抑制價(jià)平均達(dá)到1︰2084，瓊擴(kuò)效價(jià)達(dá)到1︰16以上，即為合格。如不合格，可繼續(xù)重復(fù)步驟4。

6．效價(jià)合格，收獲雞蛋。

7．將雞蛋水洗后，浸入0.50％石炭酸水中消毒半小時(shí)，撈出后，置無(wú)菌室紫外線照射20min。無(wú)菌操作去蛋皮，收取卵黃，按1︰1加入滅菌的含1％石炭酸生理鹽水，攪拌，以兩層紗布過(guò)濾，濾液即為雞新城疫和傳染性法氏囊炎二聯(lián)高免卵黃抗體。

8．4℃～8℃保存?zhèn)溆谩?/p>

（三）結(jié)果判定

1．物理性狀 呈均一的橙黃色帶膠狀的液體，放置一定時(shí)間，下沉多量的黃白色絮狀沉淀，搖勻后，仍呈均一黃色或淡白色液體。

2．效價(jià) 新城疫血凝抑制價(jià)應(yīng)大于1024×，傳染性法氏囊炎瓊擴(kuò)效價(jià)應(yīng)大于8×。

3．安全檢查 取3ml～5ml卵黃液一次皮下注射小白鼠或雛雞，無(wú)任何影響。

4．雜菌檢查 應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。

5．效力檢查 對(duì)典型的新城疫病雞和傳染性法氏囊炎病雞，肌肉或皮下注射1ml，3天內(nèi)應(yīng)有80％以上明顯好轉(zhuǎn)或痊愈。