病毒或毒素與相應(yīng)的抗體結(jié)合后，失去對易感動物的致病力，謂之中和試驗。本試驗主要用于：①從待檢血清中檢出抗體，或從病料中檢出病毒，從而診斷病毒性傳染病；②用抗毒素血清檢查材料中的毒素或鑒定細菌的毒素類型；③測定抗病毒血清或抗毒素效價；④新分離病毒的鑒定和分型，中和試驗不僅可在易感的實驗動物體內(nèi)進行，亦可在細胞培養(yǎng)上或雞胚上進行。試驗方法主要有簡單定性試驗、固定血清稀釋病毒法、固定病毒稀釋血清法、空斑減少法等。
在細胞培養(yǎng)上進行病毒中和試驗，近年來多采用空斑減少法。先將病毒稀釋成適當(dāng)濃度，使每0.2ml含80個～100個PFU（空斑形成單位），與不同稀釋度的待檢血清等量混合，置
表 空斑減少法中和試驗示例
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血清稀 釋倍數(shù)[1] |
1:16 (4-2) |
1:64 (4-3) |
1:256 (4-4) |
1:1024 (4-5) |
1:409 (4-6) |
不加 血清 對照 |
中和抗 體價[2] |
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待檢血清A |
空斑數(shù) |
3 |
13 |
38 |
51 |
53 |
55 |
4-3.6=1:140 |
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空斑減少率 |
95％ |
76％ |
31％ |
7％ |
0％ |
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待檢血清B |
空斑數(shù) |
－ |
8 |
25 |
51 |
56 |
55 |
4-4.1=1:290 |
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空斑減率數(shù) |
－ |
85％ |
54％ |
7％ |
0％ |
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待檢血清C |
空斑數(shù) |
－ |
－ |
6 |
22 |
44 |
55 |
4-5.2=1:1300 |
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空斑減少率 |
－ |
－ |
89％ |
59％ |
19％ |
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注：[1] 血清用4倍遞增稀釋；
[2] 空斑減少50％的血清稀釋度，其計算法同LD50的計算。