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免疫中和反應(yīng)技術(shù)(Neutralization test technique):簡(jiǎn)單定性中

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

病毒或毒素與相應(yīng)的抗體結(jié)合后,失去對(duì)易感動(dòng)物的致病力,謂之中和試驗(yàn)。本試驗(yàn)主要用于:①?gòu)拇龣z血清中檢出抗體,或從病料中檢出病毒,從而診斷病毒性傳染;②用抗毒素血清檢查材料中的毒素或鑒定細(xì)菌的毒素類(lèi)型;③測(cè)定抗病毒血清或抗毒素效價(jià);④新分離病毒的鑒定和分型,中和試驗(yàn)不僅可在易感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行,亦可在細(xì)胞培養(yǎng)上或雞胚上進(jìn)行。試驗(yàn)方法主要有簡(jiǎn)單定性試驗(yàn)、固定血清稀釋病毒法、固定病毒稀釋血清法、空斑減少法等。

本法主要用于檢出病料中的病毒,亦可進(jìn)行初步鑒定或定型。先根據(jù)病毒易感性選定試驗(yàn)動(dòng)物(或雞胚、細(xì)胞培養(yǎng))及接種途徑。將病料研磨,并稀釋成一定濃度(約100 LD50~1 000LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青霉素、鏈霉素各200~1 000單位),或用細(xì)菌濾器過(guò)濾,與已知的抗血清(適當(dāng)稀釋或不稀釋?zhuān)┑攘炕旌,并用正常血清加稀釋病料作?duì)照。混合后置37℃1h,分別接種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,每組至少3只。分別隔離飼喂,觀察發(fā)病和死亡情況。對(duì)照動(dòng)物死亡,而中和組動(dòng)物不死,即證實(shí)該病料中含有與該抗血清相應(yīng)的病毒。本法亦可用于毒素(如肉毒毒素)的鑒定和分型。

 

 

 
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