1．翻倍時間（Doubling Time）

細(xì)胞的翻倍時間在評價昆蟲細(xì)胞健康程度的參數(shù)中是最容易測量的。翻倍時間應(yīng)該在細(xì)胞處于對數(shù)期復(fù)制時測量，對于Sf9和Sf21細(xì)胞來說通常是介于16-24小時之間，不過大多數(shù)在20-22小時。

dt=t×ln2/ln(Ct/Co)，其中dt為翻倍時間，Co為起始細(xì)胞數(shù)目，Ct為經(jīng)過時間t后的細(xì)胞數(shù)目，t為Co和Ct兩次計數(shù)之間的間隔時間，所有的時間都以小時為單位。

2．細(xì)胞大�。–ell Size）

細(xì)胞的大小是監(jiān)測細(xì)胞健康程度的一個非常有用的參數(shù)。如果細(xì)胞是健康的，細(xì)胞的大小均一，都處于該細(xì)胞株體積正常變化范圍的下限。細(xì)胞的大小在不同的細(xì)胞株變化是很大的。對于我用過的Sf9和Sf21，典型的直徑是16-18mm，不過我知道有些細(xì)胞株小至14 mm或者大至19 mm仍然很健康。

3．滯后期（Duration of Lag）

當(dāng)細(xì)胞的密度較低時，會有一個滯后期，其長短取決于分裝或者傳代后細(xì)胞的密度。一般說來，該密度越低，滯后期越長。對于一個特定的細(xì)胞株來說，當(dāng)這個密度高出一個閾值時，滯后期的長短與密度無關(guān)；而低于一個閾值時，滯后期無限長，細(xì)胞不再增殖。

4．低密度分裝極限（Low Density Split Tolerance）

能夠在一個較短的滯后期（小于12小時）復(fù)蘇的細(xì)胞形狀較好。不過這是細(xì)胞株的特性，需要進行實驗來確定你的細(xì)胞株的密度極限。我的細(xì)胞株有些在分裝成密度為5×104細(xì)胞/ml時仍然可以很好復(fù)蘇，有些細(xì)胞株分裝成5×105細(xì)胞/ml就不能復(fù)蘇了。

5．高密度極限（High Density Maximum）

這是你的細(xì)胞能生長的最大密度，高于這個密度你的細(xì)胞將進入平臺期。這個指標(biāo)既和細(xì)胞株有關(guān)，又和使用的培養(yǎng)液有關(guān)。我建議先把你的細(xì)胞株培養(yǎng)至平臺期，然后把一些分裝到新鮮的培養(yǎng)液中以后，使剩下的繼續(xù)生長至平臺期，同時密切監(jiān)測細(xì)胞狀況。一般來說，細(xì)胞的培養(yǎng)要避免密度超過高密度極限的80%。對于我培養(yǎng)的細(xì)胞，這個極限值從2×106至12×106細(xì)胞/ml不等。