1.96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)細(xì)胞,去培養(yǎng)液。用0.01mol/L PBS洗滌1次(如為懸浮細(xì)胞則用離心洗滌)。
2.去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。
3.37℃,孵育1~4h。
4.加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。
5.在多孔酶標(biāo)儀上405nm處測(cè)光吸收度,將細(xì)胞培養(yǎng)板其中不含細(xì)胞,同樣處理過的一孔作為空白對(duì)照,所測(cè)的每孔光吸收度可間接反應(yīng)每孔中的細(xì)胞數(shù)。如在同樣條件下作一細(xì)胞數(shù)的系列標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,以細(xì)胞數(shù)為X軸,光吸收度為Y軸,可作直線回歸,可推算出每孔中的細(xì)胞。
2.去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。
3.37℃,孵育1~4h。
4.加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。
5.在多孔酶標(biāo)儀上405nm處測(cè)光吸收度,將細(xì)胞培養(yǎng)板其中不含細(xì)胞,同樣處理過的一孔作為空白對(duì)照,所測(cè)的每孔光吸收度可間接反應(yīng)每孔中的細(xì)胞數(shù)。如在同樣條件下作一細(xì)胞數(shù)的系列標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,以細(xì)胞數(shù)為X軸,光吸收度為Y軸,可作直線回歸,可推算出每孔中的細(xì)胞。