一、蟾蜍胸骨劍突軟骨細(xì)胞液泡系活體染色及觀察
(一)原理
在動物細(xì)胞內(nèi),凡是由膜所包圍的小泡和液泡除線粒體外都屬于液泡系,包括高爾基器、溶酶體、微體、消化泡、自噬小體、殘?bào)w、胞飲液泡和吞噬泡,都是由一層單位膜包圍而成。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,能合成與分泌軟骨粘蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發(fā)達(dá)。
中性紅是液泡系特殊的活體染色劑,只將液泡系染成紅色,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),細(xì)胞質(zhì)及核不被染色,中性紅染色可能與液泡中的蛋白有關(guān)。
(二)方法
取一只蟾蜍,破壞腦和脊髓,剪開胸腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,放在載片上,滴兩滴1/3000中性紅染液,染色8~lO分鐘,用吸水紙吸去染液,加一滴Ringer氏液,蓋上蓋片,吸去多余Ringer氏液。
(三)結(jié)果
顯微鏡下觀察,可見軟骨細(xì)胞為橢圓形,細(xì)胞核周圍有許多染成玫瑰紅色.大小不一的小泡,即軟骨細(xì)胞液泡系。
二、大白鼠脛骺軟骨細(xì)胞電鏡照片的觀察
動物細(xì)胞液泡很小,即使是活體染色也只能看出是一個(gè)小點(diǎn),為了進(jìn)一步看清液泡的結(jié)構(gòu)我們有必要觀察軟骨細(xì)胞的電鏡照片。
大白鼠脛骺骨細(xì)胞電鏡照片,細(xì)胞核與核仁很清楚,細(xì)胞質(zhì)中有豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),液泡系發(fā)達(dá),液泡由單層膜包圍,細(xì)胞周邊有液泡釋放。