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熒光菌通過這個方式感染健康對蝦

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2015-12-12  來源:水產(chǎn)前沿
核心提示: 今年臺風(fēng)蘇羅迪后,福建長樂對蝦發(fā)光病嚴(yán)重,筆者針對發(fā)光死蝦主要采用了病原分離、人工感染等方法,對熒光菌感染途徑進(jìn)行探究
 
    今年臺風(fēng)“蘇羅迪”后,福建長樂對蝦發(fā)光病嚴(yán)重,筆者針對發(fā)光死蝦主要采用了病原分離、人工感染等方法,對熒光菌感染途徑進(jìn)行探究,并提出了初步的防治方法。
 
    對蝦發(fā)光病是一種在對蝦養(yǎng)殖中常見的細(xì)菌性疾病,它具有發(fā)病快、傳播廣、感染力強、致死率高、防治困難等特點,是對蝦養(yǎng)成期間危害較大的流行病之一。我國對蝦發(fā)光病主要發(fā)生于福建、廣東、廣西等沿海地區(qū),主要危害凡納濱對蝦 (Penaeus vannamei) 和斑節(jié)對蝦 (Penaeus monodon)。目前的研究表明,引起對蝦發(fā)光病的病原有霍亂弧菌(V.cholerae) 、燦爛弧菌(V.splendidus) 、火神弧菌(V.logei) 、哈維氏弧菌(V.harveyi) 和費氏弧菌(V.fischeri) 5 種,但其主要病因是哈維氏弧菌感染。
 
    今年臺風(fēng)“蘇羅迪”后,福建長樂對蝦發(fā)光病嚴(yán)重,筆者針對發(fā)光死蝦主要采用了病原分離、人工感染等方法,對熒光菌感染途徑進(jìn)行探究,并提出了初步的防治方法。
 
一、研究方法
 
1、細(xì)菌分離
 
    將采自福建長樂某養(yǎng)殖場已經(jīng)死亡的發(fā)光病蝦,體表用75%乙醇消毒后,用無菌解剖刀在超凈工作臺上切開病蝦腹肌肉,用TSA和TCBS固體培養(yǎng)基對肌肉進(jìn)行細(xì)菌劃線分離,30℃培養(yǎng)24h后觀察菌落生長情況。
 
    挑取TSA和TCBS培養(yǎng)基上的典型菌落,再次劃線純化后分別接種于含2% NaCl的TSB中,30℃振蕩培養(yǎng)10h,OD560測定細(xì)菌濃度,然后分別拌料投喂,每克飼料含細(xì)菌數(shù)量為106cfu,每組40尾,對照組直接投喂,將南美白對蝦放在藍(lán)色玻璃桶(0.3m3)中飼養(yǎng)。
 
2、人工感染
 
    將取自長樂某養(yǎng)殖場的健康對蝦(體長6-8cm)飼養(yǎng)于藍(lán)色玻璃鋼桶(0.3m3),養(yǎng)殖用水為沙濾水,鹽度30‰,水溫22-24℃,暫養(yǎng)4d,每組30尾蝦。
 
    (1) 投喂感染:將試驗菌株的菌懸液(108cfu/mL)拌料制成試驗對蝦做餌料,濃度分別為102cfu/g、104cfu/g、106cfu/g,飼養(yǎng)、觀察5天,記錄對蝦死亡情況及發(fā)病癥狀,并及時移去死蝦。
 
    (2)創(chuàng)傷浸泡感染:將經(jīng)活化的新鮮試驗菌懸液 (108cfu/mL) 加入試驗用藍(lán)色玻璃鋼桶內(nèi),充氣攪拌使海水分別為102cfu/mL、104cfu/mL、106cfu/mL,然后用針頭在健康試驗對蝦腹肌上刺扎,造成創(chuàng)傷后放入帶菌的海水中。
 
    (3)普通浸泡感染:方法同(2),不同的是不用將試驗蝦刺扎,直接將其放入帶菌海水中。
 
 
嚴(yán)重感染(感染后第2、3天):游動緩慢、有明顯的胃炎、肝胰腺萎縮、體色明顯發(fā)紅
 
二、結(jié)果
 
1、分離與回歸感染
 
    從發(fā)病蝦苗體內(nèi)分離純化到3株優(yōu)勢菌A-1、A-2、A-3在TCBS培養(yǎng)基上顏色分別為綠色、 黃色、 黑色,在暗室只有A-1菌株發(fā)淡綠色熒光。經(jīng)回歸感染試驗證實,A-1能引起南美白對蝦死亡且死蝦發(fā)光,其癥狀與自然發(fā)病成蝦的癥狀相同,而其他優(yōu)勢菌均不能使死蝦發(fā)光,因此證實該菌為對蝦發(fā)光的致病菌之一。
 
2、人工感染
 
    (1)投喂感染:拌料投喂感染的實驗結(jié)果見表1。結(jié)果表明:對照組實驗期間沒有發(fā)生死亡;102cfu/g組在第3天對蝦開始死亡,實驗結(jié)束時,共死亡22尾,占73.3%;104cfu/g組在第2天開始死亡,實驗結(jié)束時,共死亡29尾,占96.7%;而106cfu/g在第2天出現(xiàn)死亡,在第4天已全部死亡。由此可見,飼料中熒光菌數(shù)量與對蝦死亡速度呈正相關(guān)。
    (2)創(chuàng)傷浸浴感染:創(chuàng)傷浸浴感染的實驗結(jié)果見表2。結(jié)果表明:對照組沒有發(fā)生死亡;102cfu/mL組在第4天開始死亡,實驗結(jié)束時,共死亡20尾,占66.7%;104cfu/mL在第3天開始死亡,實驗結(jié)束時,共死亡25尾,占83.3%;106cfu/mL組在第2天開始死亡,實驗結(jié)束時,全部死亡。由此可見,水體中的熒光菌數(shù)量與對蝦死亡速度呈正相關(guān)。
    (3)普通浸浴感染:普通浸浴感染的實驗結(jié)果見表3。結(jié)果表明:對照組、102cfu/mL組、104cfu/mL組均沒有發(fā)現(xiàn)死亡;106cfu/mL組在第4天開始死亡,實驗結(jié)束時,共死亡2條,占6.7%。由此可見,健康對蝦在含熒光菌的海水中不易被感染。
三、討論
 
    投喂感染的實驗結(jié)果表明,即使飼料中含有少量的發(fā)光細(xì)菌,仍然可以在較短的時間里,使對蝦大量死亡,這說明攝食感染是熒光菌感染健康對蝦最主要的感染方式。
 
    對蝦的捕捉搬運、受驚嚇以及頻繁活動,都有可能造成蝦體創(chuàng)傷,發(fā)光菌侵入蝦體后,利用機體組織作為營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行大量繁殖,并在熒光素酶的作用下使還原型熒光素氧化成氧化型熒光素,同時放出熒光,因而我們可見對蝦局部組織發(fā)白發(fā)光。大量繁殖的發(fā)光菌隨著蝦體的循環(huán)系統(tǒng)逐漸侵入到蝦體全身器官,遍布全身就使得蝦體全身死亡并發(fā)光。創(chuàng)傷感染的實驗結(jié)果表明,當(dāng)水體中的熒光菌含量在102cfu/mL,仍然會有超過60%的蝦發(fā)病死亡,這說明創(chuàng)傷感染也是熒光菌感染健康對蝦的一種重要途徑。
 
    本研究中普通浸浴感染的實驗結(jié)果表明,當(dāng)熒光菌濃度濃度達(dá)到106cfu/mL,會導(dǎo)致少量對蝦死亡,而當(dāng)濃度低于104cfu/mL時,不會引起對蝦死亡,在高位池中熒光菌數(shù)量一般不會超過102cfu/mL,所以說健康對蝦在含有熒光菌的蝦池較難感染發(fā)病,這說明普通浸浴感染不是引起對蝦發(fā)光的主要途徑。
 
    因此,防治南美白對蝦成蝦發(fā)光病需從切斷攝食感染和創(chuàng)傷浸浴感染途徑著手。
 
    在高位池中,可先進(jìn)行消毒,后加芽孢桿菌、光合細(xì)菌,同時投喂優(yōu)質(zhì)飼料的方法來切斷這兩種主要的感染途徑。消毒的作用是殺死病蝦、弱蝦、蝦創(chuàng)傷部位的細(xì)菌和養(yǎng)殖環(huán)境中細(xì)菌,減少病原體的來源;消毒后及時撈起死蝦,避免攝食感染;加芽孢桿菌、光合細(xì)菌的作用是消毒導(dǎo)致養(yǎng)殖環(huán)境中細(xì)菌大量死亡,養(yǎng)殖水體的菌相處于“真空”狀態(tài),添加有益細(xì)菌,能夠迅速占據(jù)有害細(xì)菌的生態(tài)位,使有害菌處于被抑制的狀態(tài);投喂優(yōu)質(zhì)飼料的目的是提高養(yǎng)殖對蝦的健康程度,尤其是提高對蝦的免疫力,有效降低感染的概率。
 
作者:福建大北農(nóng)水產(chǎn)科技有限公司  黎東
編輯:foodnews

 
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