HIV-1新發(fā)感染率的估算方法主要有隊(duì)列研究、數(shù)學(xué)模型和實(shí)驗(yàn)室方法。其中實(shí)驗(yàn)室方法主要是通過(guò)檢測(cè)HIV 感染者樣本中HIV-1抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)后的免疫標(biāo)志物來(lái)區(qū)分是否為新發(fā)感染，進(jìn)而計(jì)算發(fā)病率。本文簡(jiǎn)要介紹實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HIV-1新發(fā)感染的方法及發(fā)展過(guò)程。

1998年，美國(guó)研究人員基于人體感染HIV后產(chǎn)生的抗體滴度隨感染時(shí)間延長(zhǎng)而升高的原理，在HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，建立了低敏酶聯(lián)免疫法（less-sensitiveenzyme immunoassay，LS-EIA），又名“確定HIV新發(fā)感染的血清學(xué)檢測(cè)規(guī)程”(serologic testing algorithm for recent HIV seroconversion，STARHS)。美國(guó)疾控中心采納此法，商品化的試劑(3A11-LS和Vironostika-LS)開(kāi)始用于H1V-1新發(fā)感染檢測(cè)及監(jiān)測(cè)。此方法檢測(cè)時(shí)需要將樣本稀釋1:20000 ，其包被抗原也單一，存在著實(shí)驗(yàn)不易操作，準(zhǔn)確度相對(duì)低，僅適用于B亞型等缺點(diǎn)。

為了解決低敏酶聯(lián)免疫法的局限性，2001年美國(guó)疾控中心根據(jù)HIV IgG抗體在總抗體中所占比例隨感染時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增加的特性，將HIV的B、E和D等多個(gè)亞型的gp41合成肽連接起來(lái)作為抗原，從而建立了BED-捕獲酶聯(lián)免疫試驗(yàn)(BED capture enzyme immunoassay，BED-CELA)。該方法操作簡(jiǎn)便，具有良好的穩(wěn)定性，對(duì)HIV-1的A、B、C、D和E亞型均適用。我國(guó)于2005年底引入了該方法用于HIV-1發(fā)病率估算。此方法受CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)、病毒載量值、抗病毒治療等因素影響較大，會(huì)導(dǎo)致HIV發(fā)病率的高估，因此使用該方法需要排除一些影響因素，如CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)＜200個(gè)/μl和接受抗病毒治療人群。

抗體親和力作為抗體自身的一種屬性，所受影響因素相對(duì)于BED-CELA較少，根據(jù)HIV-1感染者血清陽(yáng)轉(zhuǎn)后抗體親和力會(huì)隨著感染時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增加的原理，建立了雙孔親和力指數(shù)(AI)方法和單孔的限制性抗原親和力酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（Limiting antigen acidity enzyme immunoassay,LAg-avidity EIA）。2001年研究人員發(fā)現(xiàn)應(yīng)用親和力試驗(yàn)可以用來(lái)識(shí)別HIV新發(fā)感染，該方法最早使用的是商品化親和力指數(shù)試劑盒——AxSYM親和力指數(shù)法，隨后美國(guó)疾病預(yù)防控制中心在2010年用大腸桿菌表達(dá)了一種高親和力基因重組gp41抗原(recombinant immunodominant region of gp41 of HIV-1group M，rIDR-M),由此研發(fā)了特異性高，估算結(jié)果更為準(zhǔn)確的限制性抗原親和力酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用于HIV-1發(fā)病率的估算。2013年，我國(guó)研發(fā)的HIV-1新發(fā)感染檢測(cè)試劑盒（限制性抗原親和力法）應(yīng)用于HIV-1發(fā)病率檢測(cè)，和國(guó)外試劑相比，該方法的窗口期和誤判率更適用于我國(guó)人群。