微生物的致病性是影響生物危害評(píng)估最重要的決定性因素。感染性微生物的危險(xiǎn)度等級(jí)分類為實(shí)驗(yàn)室生物危害評(píng)估和確立對(duì)待定病原體的生物安全防護(hù)水平奠定了基礎(chǔ)。一般地，危害度等級(jí)高的微生物需要的生物安全防護(hù)水平較高。但是，即便是對(duì)于同一種微生物，不同的實(shí)驗(yàn)操作可能產(chǎn)生的潛在危害是不同的。所以在確定適當(dāng)?shù)纳�物安全水平時(shí)，除考慮病原體的危害度等級(jí)以外，還應(yīng)考慮其他因素。例如，歸入危險(xiǎn)度二級(jí)的微生物，進(jìn)行操作處理時(shí)通常需要在BSL-2條件下進(jìn)行。然而，如果特定實(shí)驗(yàn)可能產(chǎn)生高濃度的氣溶膠時(shí)，在BSL-3條件下進(jìn)行操作則更為恰當(dāng)。又如，危害度二級(jí)的高只病性禽流感病毒和艾滋病病毒培養(yǎng)時(shí)要求在BSL-3防護(hù)水平實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作，而對(duì)于未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料則僅要求在BSL-2防護(hù)水平實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。

生物危害評(píng)估也可能在相關(guān)信息不足的情況下進(jìn)行，這時(shí)按照WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》第三版中的要求應(yīng)謹(jǐn)慎地采取一些較為保守的標(biāo)本處理方法。
1）只要采自病原體的標(biāo)本，均應(yīng)當(dāng)遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法，并采用隔離的防護(hù)措施；
2）處理此類標(biāo)本時(shí)最低需要二級(jí)生物安全水平；
3）標(biāo)本的運(yùn)送應(yīng)當(dāng)遵循國家和/或國際的相關(guān)規(guī)定。

生物危害評(píng)估不僅有助于確立實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序，有助于實(shí)驗(yàn)室的合理設(shè)計(jì)與布局，有助于實(shí)驗(yàn)設(shè)備和安全設(shè)備的正確配置與有效使用，而且有助于在工作過程中對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)操作程序以及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、設(shè)施的配備是否恰當(dāng)和使用的有效性進(jìn)行評(píng)價(jià)與改進(jìn)。所以，生物危害評(píng)估活動(dòng)應(yīng)是一個(gè)動(dòng)態(tài)的、不斷完善的過程。

加強(qiáng)安全體系建設(shè) 遠(yuǎn)離獲得性感染

實(shí)驗(yàn)室獲得性感染是指通過實(shí)驗(yàn)工作等活動(dòng)導(dǎo)致的工作人員及相關(guān)人員的感染，其中大約2/3的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染與在工作中直接接觸、使用含有傳染性病原體的標(biāo)本或生物材料等有關(guān)。最常見的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染由上呼吸道吸入，經(jīng)口食入尖銳物品刺傷接種及皮膚黏膜污染等形式的職業(yè)暴露所致。PIKE對(duì)3921例報(bào)告的實(shí)驗(yàn)室感染分析表明，其中59%源自研究性實(shí)驗(yàn)室，17%發(fā)生在臨床診斷性實(shí)驗(yàn)室。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室感染由細(xì)菌、病毒和立克次體引起。在這些實(shí)驗(yàn)室感染中氣溶膠是最主要的傳播途徑，在實(shí)驗(yàn)室以外引起的感染中70%是由噴濺、針刺或切割傷所致。

由于人類免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、特別是由于SARS 冠狀病毒等不時(shí)引起實(shí)驗(yàn)室感染的發(fā)生，人們重新認(rèn)識(shí)到臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員可能由于職業(yè)原因暴露于引起疾病、甚至是致命疾病的病原微生物。這種通過實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露獲得的感染性疾病稱作實(shí)驗(yàn)室獲得性感染。實(shí)驗(yàn)室工作人員由于長期處在具有一定生物危險(xiǎn)的環(huán)境中，同時(shí)由于實(shí)驗(yàn)室獲得性感染并不總發(fā)生，漸漸地疏忽于對(duì)實(shí)驗(yàn)室的生物安全管理，甚至放縱自己的行為而不能完全遵守相應(yīng)的安全操作規(guī)范。這就需要我們對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理進(jìn)行強(qiáng)化，通過加強(qiáng)生物安全管理并在工作過程中遵照經(jīng)長期實(shí)踐而逐步建立的安全操作規(guī)范進(jìn)行預(yù)防實(shí)驗(yàn)室獲得性感染；通過實(shí)驗(yàn)室生物安全體系建設(shè)，制定并執(zhí)行相應(yīng)生物安全水平的防護(hù)措施，繼續(xù)教育、培訓(xùn)和督促實(shí)驗(yàn)室工作人員規(guī)范自己的行為，從而把實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)降低到最低程度。

（1）實(shí)驗(yàn)室由于其規(guī)模、建筑布局、周圍環(huán)境、內(nèi)部分割及通風(fēng)條件等的不同而有不同的室內(nèi)小氣候。室內(nèi)小氣候的好壞、優(yōu)劣，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康有很大的影響。實(shí)驗(yàn)室也由于處理和檢測(cè)的標(biāo)本不同、檢測(cè)目的和方法不同，其藏匿的具有潛在感染能力的微生物的種類、數(shù)量和存在形式亦不同。不同于研究型實(shí)驗(yàn)室、臨床實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本中或生物材料中可能攜帶的潛在病原微生物往往是未知而多樣的。

（2）實(shí)驗(yàn)室在工作過程中可能造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染，如離心、混勻、接種、制片、移液、加樣等可產(chǎn)生氣溶膠污染，標(biāo)本噴濺等可直接污染皮膚黏膜及實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和地面等。另外，由于室內(nèi)環(huán)境空間的限制，設(shè)備、人員擁擠以及通風(fēng)換氣不充分等都可能使實(shí)驗(yàn)室內(nèi)病原體的濃度增加，使人群在室內(nèi)被污染的機(jī)會(huì)明顯大于室外。另外，嚙齒動(dòng)物、昆蟲等也都可攜帶傳播微生物病原體，給實(shí)驗(yàn)室工作人員健康帶來威脅。

由于實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本來自不同的患者，其傳染性和只病性也是未知的，同時(shí)，實(shí)驗(yàn)室生物安全體系建設(shè)的不平衡，所以實(shí)驗(yàn)室安全水平的正確劃分和恰當(dāng)應(yīng)用也比較困難。生物安全問題往往是因?yàn)橐恍┘?xì)節(jié)疏忽而導(dǎo)致的，所以建立完善的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)章制度、生物安全操作規(guī)程,并在實(shí)際工作中采取措施嚴(yán)保執(zhí)行,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)、同時(shí)關(guān)注實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康、制定實(shí)驗(yàn)室發(fā)生獲得性感染時(shí)的應(yīng)急預(yù)案勢(shì)在必行。

實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的四道防線

根據(jù)使用的一級(jí)和二級(jí)的防護(hù)屏障的不同，實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平分為四級(jí)，防護(hù)水平由低到高排列即：一級(jí)生物安全水平（BSL-1）、二級(jí)生物安全水平（BSL-2）、三級(jí)生物安全水平（BSL-3）和四級(jí)生物安全水平（BSL-4）。所謂一級(jí)防護(hù)屏障是指生物安全柜和個(gè)人防護(hù)裝備等構(gòu)成的防護(hù)屏障，二級(jí)防護(hù)屏障則是指實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)和通風(fēng)系統(tǒng)等構(gòu)成的防護(hù)屏障。不同級(jí)別的生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室都是基于確保處理特定傳染病原體時(shí)的工作人員和環(huán)境的安全而進(jìn)行設(shè)計(jì)的。

BSL-1：一級(jí)生物安全水平
BSL-1是圍護(hù)屏障水平和生物安全級(jí)別最低的生物實(shí)驗(yàn)室，在該級(jí)別實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的操作都是在室內(nèi)開放空間進(jìn)行的，所以，在其中活動(dòng)所涉及的生物因子應(yīng)是已知不引起健康成人感染的微生物。但是，應(yīng)注意這些微生物也許有可能引起幼兒、老人或免疫患者的機(jī)會(huì)感染。

BSL-2：二級(jí)生物安全水平
BSL-2主要用于處理中度危險(xiǎn)的病原體，如沙門氏菌屬和乙型肝炎病毒等。這些病原體可能通過意外的經(jīng)口攝入或經(jīng)皮膚、黏膜暴露而感染。在遵守標(biāo)準(zhǔn)操作程序的情況下，這些病原體的處理可在開放實(shí)驗(yàn)臺(tái)進(jìn)行。但是，如預(yù)期有發(fā)生噴濺或可產(chǎn)生氣溶膠時(shí)應(yīng)使用生物安全柜等。

BSL-3：三級(jí)生物安全水平
BSL-3是為應(yīng)對(duì)主要通過氣溶膠傳播的病原微生物如結(jié)核分支桿菌等的實(shí)驗(yàn)室操作而設(shè)計(jì)的。BSL-3有嚴(yán)格的操作規(guī)程和程序，使用一級(jí)和二級(jí)防護(hù)屏障，同時(shí)對(duì)于諸如通風(fēng)系統(tǒng)都有特殊的要求。

BSL-4：四級(jí)生物安全水平
BSL-4用于可引起致命疾病的病原體的處理和實(shí)驗(yàn)操作，這些病原體可能通過氣溶膠傳播的或者沒有有效的疫苗預(yù)防或沒有有效的治療方法。BSL-4實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)操作一般地應(yīng)在三級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，或由身著正壓防護(hù)服的工作人員進(jìn)行操作處理。BSL-4實(shí)驗(yàn)室應(yīng)是完全獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室，其通風(fēng)系統(tǒng)和廢物處理亦應(yīng)完全獨(dú)立。