滿山紅為杜鵑花科植物興安杜鵑Rhododendran dauricum L.的干燥葉。2005版《中國藥典》一部采用高效液相色譜法測定杜鵑素的含量,文獻報道的滿山紅中杜鵑素的含量測定方法主要為高效液相色譜法。
2005版《中國藥典》滿山紅含量測定項下:
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(60:40)為流動相;檢測波長為295nm.理論板數(shù)按杜鵑素峰計算應(yīng)不低于2000。
供試品溶液的制備:取本品細粉約1克,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入60%甲醇50ml,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)15分鐘,放冷,再稱定重量,用60%甲醇補足減失的重量,濾過。精密量取續(xù)濾液25ml,蒸干,殘渣加60%甲醇溶液,轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,即得。
文獻報道的HPLC法中,常用的流動相系統(tǒng)為甲醇(乙腈)-水或加入磷酸調(diào)節(jié)pH值。如:
付饒等測定滿山紅軟膠囊中杜鵑素含量,采用RAINN SD200 高效液相色譜儀;色譜柱:Hypersil BDS C18 250mm×4.6mm,5μm;流動相:甲醇-水(60:40) ;檢測波長297nm;柱溫室溫。
馬洪波等測定消咳喘糖漿中槲皮素和杜鵑素的含量,采用W aters 2695 高效液相色譜儀;W aters Nova-pak C18色譜柱(150mm×3.9mm,4μm);流動相:乙腈-水-磷酸(200:300:1);檢測波長297nm;柱溫25℃;流量梯度法: 0~12 min, 0.2mL/m in; 12~13m in, 0.2~0.9mL/m in; 13~19min, 0.9mL/m in; 19~20min,0.9~0.2mL/m in; 20~25min, 0.2mL/m in。
潘馨測定滿山紅中杜鵑素、槲皮素的含量,采用美國Agilent 1100 高效液相色譜儀;色譜柱:Nova - pak C18 (250mm×4. 6mm,4μm);流動相為乙腈-水(45:55) ,檢測波長為296nm。