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【解讀】維生素B1的前處理,精華都在這里了!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-11-16
核心提示:在我們買的食品中都會看到一個營養(yǎng)標(biāo)簽,有時會在標(biāo)簽中看到維生素B1的含量,接下來就讓我們了解一下維生素檢測前處理的步驟吧。
試劑配制

20g/l的鐵氰化鉀溶液:稱取1g鐵氰化鉀,先用少量的水溶解后再定容至50ml。

100g/l的氫氧化鈉溶液:稱取10g氫氧化鈉,加水溶解后定容至100ml。

堿性鐵氰化鉀:將上述的5ml鐵氰化鉀和100ml的氫氧化鈉混合均勻后備用(現(xiàn)用現(xiàn)配)。

0.1mol/l的鹽酸溶液:準(zhǔn)確移取8.5ml濃鹽酸,加水稀釋至1000ml。

2.0mol/l乙酸鈉溶液:稱取27.1g乙酸鈉,用水溶解后定容至100ml

混合酶溶液:稱取1.76g木瓜蛋白酶和1.27g淀粉酶,加水定容至50ml,渦旋混勻后冷藏密封保存,臨用時現(xiàn)取。

 

樣品提取

1.稱取5g(精確至0.01g)固體試樣或10g液體試樣于帶塞子的錐形瓶中,加60ml0.1mol/l的鹽酸溶液,充分搖勻后塞上塞子,高壓滅菌鍋中121℃,30min.冷卻至常溫后搖勻。

2.用2.0mol/l的乙酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH至4.0左右,準(zhǔn)確移取2.0ml混合酶溶液,搖勻后放入培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)16h。

3.將溶液用漏斗全部移至100ml容量瓶中,定容至刻度,搖勻后過濾。

試液制備

1.準(zhǔn)確移取濾液2.0ml至10ml的離心管中,加入1.0ml的堿性鐵氰化鉀溶液,渦旋混勻后,加入2.0ml的正丁醇,渦旋1.5min后離心五分鐘。

2.吸取上層經(jīng)0.45μm有機微孔濾膜過濾,取濾液2ml放入棕色進樣瓶中待測。

 

其他

到這一步維生素B1的前處理就完成了,特別要注意以下幾點:

1.混合蛋白酶和堿性鐵氰化鉀要現(xiàn)用現(xiàn)配,曾經(jīng)小編這里就出現(xiàn)過蛋白酶密封放冰箱三天就會變臭,可能是因為酶活性高,容易變質(zhì)。

2.一定不要忘記加1.0ml堿性鐵氰化鉀,否則不出峰。

3.離心之前一定要渦旋1.5min,或者手動搖勻1.5min,使維生素B1充分提取出來。

4.拔針頭時注意安全,使用完后將針頭蓋好,保護他人安全。

文章由小編編輯整理,參考GB 5009.84-2016,轉(zhuǎn)載請注明出處。

編輯:songjiajie2010

 
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