一、檢出限
用特定分析方法在給定的置信度內(nèi)可從樣品中定性檢出待測(cè)物質(zhì)的最低濃度或最小量即為方法的檢出限。方法檢出限的計(jì)算和表達(dá)方法有很多,常見的包括空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法、信噪比法、逐步稀釋法等。同一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)不同的檢出限表達(dá)結(jié)果差異可能會(huì)達(dá)到幾個(gè)數(shù)量級(jí)。實(shí)驗(yàn)室在選擇檢出限的表示方法時(shí),應(yīng)盡可能的研究多種表示方法,對(duì)比結(jié)果,選擇最佳的方法來表示該方法的檢出限。如果檢測(cè)方法中已給方法檢出限,則在給出的方法檢出限濃度水平上,通過分析該濃度水平的樣品,用以驗(yàn)證給出方法檢出限,分析結(jié)果應(yīng)在給出的方法檢出限±20%范圍內(nèi);若方法未給出檢出限,實(shí)驗(yàn)室則應(yīng)選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)姆椒ㄑ芯考坝?jì)算表示。下面詳細(xì)闡述各種方法檢出限的計(jì)算表達(dá)方式。
1、空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法(適用于光譜法檢測(cè))
按照樣品分析的全部步驟,重復(fù)n(n≥7)次空白試驗(yàn),將多次測(cè)定結(jié)果換算為樣品中的濃度或含量,計(jì)算n次平行測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差,按公式計(jì)算方法檢出限。
MDL= t (n 1,0.99)×S
MDL——方法檢出限;
n——樣品平行測(cè)定的次數(shù);
t——自由度為n-1,置信度為99%時(shí)的t分布(單側(cè));
S——n次平行測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差
其中,當(dāng)自由度為n -1,置信度為99% 時(shí)的t 值可參考表取值。
平行測(cè)定次數(shù)(n) | 自由度(n-1) | t (n 1,0.99) |
7 | 6 | 3.143 |
8 | 7 | 2.998 |
10 | 9 | 2.821 |
11 | 10 | 2.764 |
16 | 15 | 2.602 |
21 | 20 | 2.528 |
2、信噪比法(適用于色譜法檢測(cè))
對(duì)空白樣品加入一定濃度(一般為估計(jì)的方法檢出限)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),按照樣品分析的全部步驟進(jìn)行試驗(yàn),計(jì)算儀器上待測(cè)物與噪聲的信號(hào)比值,若信噪比S/N>3時(shí),則進(jìn)一步減少加標(biāo)濃度,反之則增加加標(biāo)濃度重新進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)信噪比S/N=3時(shí),則對(duì)應(yīng)的樣品濃度為該方法的檢出限,按公式計(jì)算方法檢出限。
MDL=S/b
S——儀器噪音的3倍,即儀器能辨認(rèn)的最小的物質(zhì)信號(hào);
b——校準(zhǔn)曲線回歸方程中的斜率;
3、最小液滴體積法(適用于滴定法檢測(cè))
一般根據(jù)所用的滴定管產(chǎn)生的最小液滴的體積來計(jì)算,按公式計(jì)算方法檢出限。
MDL= kλρV0M1/ M0V1
λ——被測(cè)組分與滴定液的摩爾比;
ρ——滴定液的質(zhì)量濃度,g/ml;
V0——滴定管所產(chǎn)生的最小液滴體積,ml;
M0——滴定液的摩爾質(zhì)量,g/mol;
V1——被測(cè)組分的取樣體積,ml;
M1——被測(cè)項(xiàng)目的摩爾質(zhì)量,g/mol;
k——當(dāng)為一次滴定時(shí),k=1;當(dāng)為反滴定或間接滴定時(shí),k=2。
二、定量限
在限定誤差能滿足預(yù)定要求的前提下,用特定方法能夠準(zhǔn)確定量測(cè)定待測(cè)物質(zhì)的最低濃度或最小量即為方法的定量限。一般取3~4倍的方法檢出限作為方法的定量限。
三、選擇性
選擇性是指用某種分析方法測(cè)定某組分時(shí),能夠避免樣品中其他共存組分干擾的能力。如果方法已提供了干擾情況的所有信息,則實(shí)驗(yàn)室無(wú)需對(duì)干擾情況采取進(jìn)一步的研究。如果方法未提供干擾情況的信息或信息不完整,則須對(duì)可能存在的干擾情況進(jìn)行研究。
對(duì)于化學(xué)分析方法,在有干擾的情況下,如:基質(zhì)成分、代謝物、降解產(chǎn)物、內(nèi)源性物質(zhì)等,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要,實(shí)驗(yàn)室可使用但不限于下述兩種方法檢查干擾:
方法1:分析一定數(shù)量的代表性空白樣品,檢查在目標(biāo)分析物出現(xiàn)的區(qū)域是否有干擾(信號(hào)、峰等);
方法2:在代表性空白樣品中添加一定濃度的有可能干擾分析物定性和/或定量的物質(zhì)。
四、線性范圍
對(duì)于分析方法而言,用線性計(jì)算模型來定義儀器響應(yīng)與濃度的關(guān)系,該計(jì)算模型的應(yīng)用范圍即為線性范圍。在對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行線性及校準(zhǔn)驗(yàn)證時(shí),應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)文件規(guī)定的各個(gè)濃度點(diǎn)配制校準(zhǔn)曲線,以驗(yàn)證儀器的測(cè)定上限及下限是否能滿足標(biāo)準(zhǔn)文件所規(guī)定的線性范圍,以及由此得到的相關(guān)系數(shù)r是否滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。
五、精密度
在規(guī)定條件下,多次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果間的一致程度即為精密度。精密度包括重復(fù)性和再現(xiàn)性,一般采取有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)室指定某一名檢測(cè)人員對(duì)高、中、低三種不同含量水平(高、中、低三種含量水平建議依次為10倍定量限、2倍定量限、定量限)的同一樣品,按樣品處理程序每個(gè)樣品平行測(cè)定6次,分別計(jì)算不同濃度或含量樣品的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等各項(xiàng)參數(shù),計(jì)算結(jié)果應(yīng)小于或等于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的重復(fù)性限r(nóng)。
六、準(zhǔn)確度
檢測(cè)結(jié)果與樣品真值間的一致程度即為準(zhǔn)確度,一般采用測(cè)定有證標(biāo)準(zhǔn)樣品或加標(biāo)回收試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估驗(yàn)證。若實(shí)驗(yàn)室使用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行準(zhǔn)確度驗(yàn)證,則需對(duì)對(duì)3個(gè)不同含量水平(含量水平的選擇見“五、精密度”)的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定,每個(gè)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品按全程序平行測(cè)定6 次,分別計(jì)算不同濃度或含量水平有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)誤差等各項(xiàng)參數(shù)。若實(shí)驗(yàn)室對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)進(jìn)行準(zhǔn)確度驗(yàn)證,則需對(duì)每個(gè)樣品類型的不同含量水平的統(tǒng)一樣品中分別加入一定量的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定,每個(gè)加標(biāo)樣品按全程序平行測(cè)定6次,分別計(jì)算每個(gè)統(tǒng)一樣品的加標(biāo)回收率。
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