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實(shí)驗(yàn)室做標(biāo)準(zhǔn)曲線,這15個(gè)問(wèn)題必須要注意!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-04-12
核心提示:1.儀器一定要校驗(yàn)好。這個(gè)不用說(shuō)為什么了。2.移取液體體積要精確,保證迅速準(zhǔn)確,盡可能用一根移液管;為減少人為誤差,同一種液
 1.儀器一定要校驗(yàn)好。這個(gè)不用說(shuō)為什么了。


2.移取液體體積要精確,保證迅速準(zhǔn)確,盡可能用一根移液管;為減少人為誤差,同一種液體要一個(gè)人操作。


3.保證標(biāo)準(zhǔn)品的純度,所用標(biāo)準(zhǔn)品最好是新打開(kāi)的,純度較高的固體或溶液,防止污染。


4.容器要保證潔凈。容器保持清潔有時(shí)甚至比其他方面更重要,千萬(wàn)不要忽略。

 

5.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品理化性質(zhì)注意加樣的先后順序。



6.如果要測(cè)OD值,應(yīng)保證測(cè)前各管液體充分混勻。


7.若多次測(cè)試,有某個(gè)點(diǎn)誤差較大,應(yīng)舍棄。


8.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。

 

9.并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對(duì)于呈s型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度最陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。


10.最好采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。


 



11.檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對(duì)低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。


12.標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。


13.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng),但一般來(lái)說(shuō),相關(guān)系數(shù)r至少要大于0.98,對(duì)于有些實(shí)驗(yàn),至少要0.99甚至是0.999。


14.標(biāo)準(zhǔn)曲線需要人為的增加(0,0)點(diǎn)嗎?

 

不能增加。通常的標(biāo)準(zhǔn)系列多是配制0,1,2,3mg/L系列這樣的說(shuō)法,沒(méi)做實(shí)驗(yàn)人為添加(0,0)很不妥,因?yàn)楹芏鄷r(shí)候0管進(jìn)入儀器可能也有響應(yīng)值,這也是我們考察試劑空白的一個(gè)重要步驟。這個(gè)0管在某些時(shí)候非常重要,如,全血鉛測(cè)定,我們采用牛血清來(lái)基體匹配標(biāo)準(zhǔn)系列,如果此時(shí)你用酸做空白或沒(méi)做實(shí)驗(yàn)人為添加(0,0),那你就很難做好標(biāo)準(zhǔn)曲線,所以,標(biāo)準(zhǔn)曲線的0管也是做好標(biāo)準(zhǔn)曲線的重要考慮點(diǎn)。


15.標(biāo)準(zhǔn)曲線需要減掉試劑空白來(lái)做嗎?

 

不需要。儀器測(cè)出來(lái)標(biāo)準(zhǔn)系列的響應(yīng)值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應(yīng)值來(lái)做,工作中我們也常用0管來(lái)做儀器調(diào)零。其實(shí)沒(méi)有必要那么麻煩,即使空白或0管有響應(yīng)值,在構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),我們已經(jīng)認(rèn)為該響應(yīng)值就是0濃度,也就是扣除了這個(gè)空白的。

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編輯:songjiajie2010

 
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