日常實(shí)驗(yàn)中,我們偶爾會(huì)吸取高粘稠的液體,比如說(shuō)TWEEN-20,或者是高粘度的蛋白,在用槍吸取的時(shí)候,常常會(huì)感覺(jué)液體吸取的很慢,打出的時(shí)候又很容易殘留液體,吹不干凈,還容易一不小心吸到槍里。這里給大家介紹兩種方式:
1、無(wú)論槍頭的體積是適用于多少,槍頭口都很細(xì)小,這也是造成粘稠液體難以吹打的原因之一。所以我們可以用剪子把槍頭的尖口處剪掉,然后再去吸取粘稠液體;
2、我們可以在槍的第二個(gè)卡頓點(diǎn)處時(shí)吸液,在第一個(gè)卡頓點(diǎn)處吹出液體。這樣做就可以彌補(bǔ)掛在槍頭處的部分液體;
3、如果實(shí)驗(yàn)室有條件的話,可以使用外置活塞式移液器,也就是油槍,小編也只是聽(tīng)說(shuō)過(guò),并沒(méi)有見(jiàn)過(guò)。但是這種移液器不但可以準(zhǔn)確地吸出高粘度液體,還可以移取容易起泡的液體,很牛逼的樣子。
有時(shí)候在配制大體積液體,遇到這種情況,也就馬馬虎虎的糊弄過(guò)去了,但是在做PCR實(shí)驗(yàn)加樣時(shí),本身每一步加的量就很少,再有一點(diǎn)殘存在槍頭里,誤差就太大了。遇到這種情況,解決的方法如下:
1、使用進(jìn)口槍頭(高品質(zhì)、超低吸附);
2、你可能要檢查一下自己的移液器了,它的密封性可能出了問(wèn)題;
3、請(qǐng)你的老板買(mǎi)一個(gè)“油槍”給你。
這一點(diǎn)小編也很奇怪,吸取大體積的液體時(shí)很少遇到這種情況,但是吸取的液體體積越小,越容易出現(xiàn)氣泡的情況,尤其是在PCR加樣時(shí),一般這種情況的原因有很多,對(duì)癥下藥就好了:
1、可能是你的槍頭和槍并沒(méi)有接觸嚴(yán)密;
2、沒(méi)有將槍插到液面下面,所以你在吸取液體的時(shí)候自然而然就會(huì)吸進(jìn)去空氣;
3、加樣速度太快,沒(méi)有吸滿液體就把槍拿出來(lái);
4、SDS這類的表面活性劑很容易氣泡。
這就是所謂的倒吸,是用槍的大忌。如果不小心吸進(jìn)去了液體,一定要及時(shí)清理,不然會(huì)使槍體生銹、腐蝕影響精準(zhǔn)度、如果實(shí)驗(yàn)室里有用廢的槍,可以那它練手,學(xué)著拆卸移液器,這樣出現(xiàn)問(wèn)題的時(shí)候,可以自己修理。
日常實(shí)驗(yàn)室中比較方便的自檢方法:
1、可以分別檢測(cè)一把移液器的最大量程、50%的量程和10%的量程吸取的液體的質(zhì)量,每個(gè)量程測(cè)三次,取平均值;
2、根據(jù)當(dāng)時(shí)的環(huán)境溫度,將三個(gè)平均值分別乘以水的密度系數(shù),這樣就可以得到相應(yīng)的體積,應(yīng)用的就是初中學(xué)到的密度=質(zhì)量/體積的公式;
3、之后就可以把計(jì)算出的體積和槍的精準(zhǔn)度比較了。
說(shuō)了這么多,其實(shí)就是想告訴大家,做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,別嫌麻煩,不管你是什么星座,都希望你在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候是處女座!
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