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分光光度法測定中，除了需從試樣的角度選擇合適的顯色反應(yīng)和顯色條件外，還需從可見分光光度計(jì)/紫外可見分光光度計(jì)等儀器的角度選擇適宜的測定條件，以保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確度。
1.入射光波長的選擇
在最大吸收波長處測定吸光度不僅能獲得高的靈敏度，而且還能減少由非單色光引起的對朗伯-比爾定律的偏離。因此在分光光度法測定中一般選擇最大吸收波長為入射波長。
2. 參比溶液的選擇
在實(shí)驗(yàn)中，要選擇合適的空白溶液作為參比溶液來調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)，以便消除顯色溶液中其他有色物質(zhì)的干擾，抵消吸收池和試劑對入射光的影響。根據(jù)試樣溶液的性質(zhì)，選擇合適組分的參比溶液很重要。
3. 吸光度范圍選擇與控制
任何分光光度計(jì)都有一定的測量誤差，測量誤差的來源主要是光源的發(fā)光強(qiáng)度不穩(wěn)定法，光電效應(yīng)的非線性，電位計(jì)的非線性，雜散光的影響，單色器的光不純等因素，對于一臺固定的分光光度計(jì)來說，以上因素都是固定的，也就是說它的誤差具有一定穩(wěn)定性。
4.比色皿的使用
選擇適宜規(guī)格的比色皿，盡量把吸光度值調(diào)整在0.2~0.8之間。同一實(shí)驗(yàn)使用同一規(guī)格的同一套比色皿，以減少測量誤差，所以用普通分光光度法不適用于高含量或極低含量物質(zhì)的測定。
1.入射光波長的選擇
在最大吸收波長處測定吸光度不僅能獲得高的靈敏度，而且還能減少由非單色光引起的對朗伯-比爾定律的偏離。因此在分光光度法測定中一般選擇最大吸收波長為入射波長。
2. 參比溶液的選擇
在實(shí)驗(yàn)中，要選擇合適的空白溶液作為參比溶液來調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)，以便消除顯色溶液中其他有色物質(zhì)的干擾，抵消吸收池和試劑對入射光的影響。根據(jù)試樣溶液的性質(zhì)，選擇合適組分的參比溶液很重要。
3. 吸光度范圍選擇與控制
任何分光光度計(jì)都有一定的測量誤差，測量誤差的來源主要是光源的發(fā)光強(qiáng)度不穩(wěn)定法，光電效應(yīng)的非線性，電位計(jì)的非線性，雜散光的影響，單色器的光不純等因素，對于一臺固定的分光光度計(jì)來說，以上因素都是固定的，也就是說它的誤差具有一定穩(wěn)定性。
4.比色皿的使用
選擇適宜規(guī)格的比色皿，盡量把吸光度值調(diào)整在0.2~0.8之間。同一實(shí)驗(yàn)使用同一規(guī)格的同一套比色皿，以減少測量誤差，所以用普通分光光度法不適用于高含量或極低含量物質(zhì)的測定。
