放行是藥品生產(chǎn)過程的最后環(huán)節(jié)。對于無菌藥品放行過程應(yīng)更關(guān)注生產(chǎn)環(huán)節(jié)的微生物控制水平。本文以放行評估時檢查的主要內(nèi)容與原輔料、過程產(chǎn)品控制、生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)測、制藥用水的生物負荷和內(nèi)毒素控制等無菌藥品生產(chǎn)關(guān)鍵點等入手，詳述了無菌藥品放行應(yīng)重點關(guān)注的各個方面，以期切實有效地提高無菌藥品生產(chǎn)過程無菌保障水平。

引言

批放行是對所有藥品生產(chǎn)和控制記錄進行評審和批準的過程，是生產(chǎn)過程的最后環(huán)節(jié)，是防止不合格產(chǎn)品流入市場的最后關(guān)口。批放行應(yīng)由質(zhì)量部門負責，以確定是否符合所有已建立并經(jīng)批準的書面程序。在評估產(chǎn)品是否有效的同時，無菌產(chǎn)品評估也帶來了一些額外的問題。無菌藥物制劑中微生物的存在可能會降低其效力或使其對消費者產(chǎn)生危害，無菌藥品存在微生物后果的嚴重性根據(jù)制劑的目的和給藥途徑的不同而不同。無菌產(chǎn)品的微生物污染，與生產(chǎn)、使用等全過程污染風(fēng)險的控制程度有關(guān)。因此，評估可能影響無菌保證的控制因素對批放行過程非常重要。

我國GMP規(guī)定，每批藥品均應(yīng)當由質(zhì)量受權(quán)人簽名批準放行^[1]。質(zhì)量受權(quán)人承擔放行責任人職責。放行責任人是一個責任重大的崗位，特別是無菌藥品，根據(jù)產(chǎn)品的品種不同，需要具備豐富的化學(xué)、生物學(xué)以及了解生產(chǎn)制造工藝的專業(yè)知識和經(jīng)驗。放行前，放行責任人應(yīng)充分評估無菌藥品生產(chǎn)記錄、生產(chǎn)過程監(jiān)測數(shù)據(jù)和檢驗結(jié)果，以確保藥品生產(chǎn)的全過程符合GMP法規(guī)的要求，產(chǎn)品質(zhì)量滿足企業(yè)或藥典標準。本文從放行評估時檢查的主要內(nèi)容與無菌藥品生產(chǎn)關(guān)鍵點等方面詳述了無菌藥品放行應(yīng)注意的事項。

Part 1 無菌產(chǎn)品放行評估時應(yīng)確認的主要內(nèi)容

作為放行評審的一部分，放行責任人應(yīng)對每批記錄進行以下檢查：

•檢查所有記錄是否完整，包括在所附單據(jù)、簽名和日期；

•確保生產(chǎn)批次在批準的批量范圍；

•檢查計算是否按照確定的公式進行。檢查計算結(jié)果是否正確執(zhí)行；

•在文件審核過程中，確保審批框已完成并簽字確認；

•確認操作人員已經(jīng)簽字確認一個步驟已經(jīng)完成，但不是一個步驟已經(jīng)完成的獨立驗證；

•確保所有修改更正符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范要求；

•檢查標簽樣本打印是否清晰，所示劑量是否正確；

•當中間記錄在其他地方歸檔時，檢查中間記錄真實性；

•已考慮到任何可控的變化；

•已進行或啟動任何額外的抽樣、測試、檢查或調(diào)查；

•檢查成品測試結(jié)果是否符合要求；

•記錄中報告的偏差已完成調(diào)查并采取了糾正和預(yù)防措施；

•該批次產(chǎn)品的批號、數(shù)量、生產(chǎn)日期與有效期。

Part 2 無菌藥品放行關(guān)注的具體要點

（1）原輔料。原輔料的質(zhì)量必須經(jīng)過評估，確認其來自經(jīng)批準的供應(yīng)商（符合藥典標準），且該原料已由本企業(yè)正確接收、取樣并進行檢測合格，符合供應(yīng)商與制造商確定的質(zhì)量標準。在無菌保證方面，應(yīng)當涵蓋微生物限度檢查。經(jīng)檢測合格的原輔料才可用于產(chǎn)品生產(chǎn)。

原輔料一般包括接收、儲存、使用等環(huán)節(jié)，放行過程應(yīng)對每個環(huán)節(jié)進行關(guān)注，重點關(guān)注：每批原材料、中間體或包裝材料的名稱和數(shù)量；供應(yīng)商名稱以及有關(guān)資質(zhì)文件；供應(yīng)商的控制編號或其他識別編號；物料的內(nèi)部編號；接收日期；物料使用的記錄；通QC對原輔料檢查情況；材料符合既定規(guī)格的檢查和評審的文件；不合格原材料、中間體或包裝材料的處理方式等。

（2）過程產(chǎn)品控制。無菌藥品生產(chǎn)的一個重要特點是在生產(chǎn)過程的不同階段對產(chǎn)品進行微生物監(jiān)測。雖然這種監(jiān)測可能與無菌或非無菌的概率沒有直接關(guān)系，但這種監(jiān)測是一種很好的指標，可以判斷是否有什么地方出了問題或可能出問題。在這里，應(yīng)該為從原材料開始合成到最終滅菌之間的每個處理階段建立和證明時間限制。

監(jiān)測內(nèi)容應(yīng)包括：進料藥品成分和包裝成分的微生物限度和細菌內(nèi)毒素監(jiān)測；使用總細菌數(shù)（TVC）技術(shù)進行過程中生物負荷監(jiān)測；預(yù)滅菌過濾生物負荷監(jiān)測；消毒劑有效性測試，包括耐藥菌株檢查。

在批放行方面，有必要確認抽樣已經(jīng)按照預(yù)先批準的抽樣計劃進行，所有的測試方法都應(yīng)得到驗證。對任何超出限額或超出趨勢的結(jié)果進行評估，并對該批產(chǎn)品的影響進行評估。

此外，記錄應(yīng)詳細說明：材料被按正確的順序使用；物料被混合和攪拌所需的時間長度；設(shè)備或產(chǎn)品的清潔保持時間，以確保它們在有效時間內(nèi)使用。

以下也應(yīng)作為中間生產(chǎn)的一部分進行評估：中間體的名稱、批號或代碼；完整的原材料和中間體清單；每種原料或中間體的準確數(shù)量或比例，包括計量單位。

另外，在批記錄中應(yīng)詳細說明以下內(nèi)容：要遵循的規(guī)程；使用的工藝參數(shù)范圍；用于關(guān)鍵設(shè)備準備的方法或參考方法（如清潔、裝配等）；取樣說明和過程控制，必要時應(yīng)列出可接受標準；完成個別處理步驟和/或整個流程的時間限制；預(yù)期收率范圍等。

（3）環(huán)境監(jiān)測評估。環(huán)境監(jiān)測是評估制藥設(shè)施內(nèi)環(huán)境質(zhì)量能夠保持有效控制的一個重要手段。無菌生產(chǎn)過程的環(huán)境監(jiān)測應(yīng)制定方案，并經(jīng)過批準。正式方案應(yīng)將浮游菌、沉降菌、懸浮粒子以及工作人員衛(wèi)生情況和設(shè)施設(shè)備打的表面微生物納入監(jiān)測，取采樣（監(jiān)測點）位置應(yīng)進行評估，一般選取為可能對產(chǎn)品生產(chǎn)產(chǎn)生不利的位置。對于環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的異常，必須進行偏差調(diào)查，確定根本原因，并采取相應(yīng)的糾正和預(yù)防措施。特別是當A級區(qū)域超標準時，需要進行詳細的評估，以確定該批是否適合放行。放行審核前應(yīng)確認確信環(huán)境監(jiān)測已按照方案計劃進行。

環(huán)境監(jiān)測一般選用以下方式進行取采樣：

①被動空氣取樣：沉降碟；

②主動空氣采樣：容積式空氣采樣器；

③表面樣品：接觸（RODAC）碟；

④表面樣品：拭子；

⑥指盤（從事灌裝工作的人員需要）；

⑦衣袖/罩衣板（參與填充活動的工作人員所需）；

⑧粒子計數(shù)。

環(huán)境監(jiān)測應(yīng)貫穿于整個無菌灌裝全過程。批次相關(guān)的監(jiān)控不僅包括灌裝期，還包括以下幾個階段：準備階段；灌裝階段、灌裝后灌裝機關(guān)鍵表面監(jiān)測（包括灌裝泵、灌裝針等與藥液接觸的位置）。

（4）制藥用水的生物負荷和內(nèi)毒素控制。制藥用水作為一般無菌藥品特別是注射劑使用量最大的物質(zhì)，應(yīng)當采用合適制備、儲存和分配方法以確保在使用時內(nèi)毒素始終處于符合規(guī)定的水平。循環(huán)系統(tǒng)和用戶使用點需要定期監(jiān)測內(nèi)毒素和微生物負荷。比如，F(xiàn)DA規(guī)定內(nèi)毒素濃度為＜0.25EU/mL，微生物負荷濃度為不超過10CFU/100mL（以R2A瓊脂為培養(yǎng)基，采用膜過濾法），并不得檢出耐熱菌。

圍繞水系統(tǒng)的各項控制措施應(yīng)該到位。如果出現(xiàn)了任何控制故障，應(yīng)盡快評估風(fēng)險。通常水系統(tǒng)記錄不納入批生產(chǎn)記錄中，但批記錄審查過程應(yīng)充分了解生產(chǎn)過程中水系統(tǒng)出現(xiàn)的任何偏差，并評估偏差對生產(chǎn)過程與產(chǎn)品質(zhì)量的影響，尤其是與內(nèi)毒素污染風(fēng)險有關(guān)的影響。

（5）質(zhì)量控制（QC）檢驗。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品種類與性質(zhì)及有關(guān)規(guī)定要求，確定QC檢驗的具體項目與方法，并建立該品種產(chǎn)品的檢驗記錄。檢驗記錄應(yīng)當包括以下內(nèi)容：

①為確保符合既定規(guī)范和標準而進行的所有檢測的完整數(shù)據(jù)；

②應(yīng)對收到的用于檢測的樣品進行描述，包括物料名稱或來源、批號以及制造商和/或供應(yīng)商；

③測試方法的參考依據(jù)；

④對每種測試中所使用的樣品重量或尺寸的說明，如該方法所描述的；

⑤必須提供全部參考標準品、試劑和標準溶液的制備和測試數(shù)據(jù)；

⑥應(yīng)完整存檔檢驗過程產(chǎn)生的所有完整的原始記錄；

⑦與測試有關(guān)的所有計算的記錄，如測量單位、換算系數(shù)和等效系數(shù)；

⑧測試結(jié)果的聲明，以及它們?nèi)绾闻c既定的驗收標準進行比較；

⑨需要提供對已建立的分析方法進行任何修改的理由；

⑩OOS調(diào)查。

（6）滅菌和去熱原控制。無菌生產(chǎn)過程的不同階段均需考慮滅菌或去熱原。部分操作是在生產(chǎn)過程中進行，部分為直接購入的無菌原輔包材。對于無菌原輔包材料，必須對供應(yīng)商提供的檢驗合格證明進行評估，以確定滅菌有效性。此外，藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)通過對供應(yīng)商審計的方式，對供應(yīng)商所承擔的無菌產(chǎn)品制造與滅菌效果進行監(jiān)督與評估。

對于生產(chǎn)中進行的滅菌和去熱原過程，批放行過程必須包括對所有控制參數(shù)的評估。這些過程涉及到容器、小瓶、瓶塞等。對于最終滅菌的產(chǎn)品，滅菌是對成品進行的。重要的是，滅菌記錄應(yīng)用于每次滅菌運行，并應(yīng)作為批放行程序的一部分予以批準。

在去熱原作用下，這一過程是滅活內(nèi)毒素所必需的。使用玻璃器皿進行無菌灌裝的產(chǎn)品，使用干熱隧道烘箱去熱原是過程的關(guān)鍵部分。FDA內(nèi)毒素失活（去熱原）過程驗證的監(jiān)管標準是，通過內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗，即去熱原烘箱的溫度和設(shè)備在烘箱內(nèi)停留時間必須在控制參數(shù)之內(nèi)（一般應(yīng)大于250℃，30min），能夠?qū)⒏邉┝績?nèi)毒素（＞10,000EU/裝置）容器，降低3個log10。USP新發(fā)布的《干熱去熱原（DRY HEAT DEPYROGENATION）》對去熱原標準進行了重新修訂，即處理后的樣品內(nèi)毒素不大于0.1EU^[3]。

采用濕熱滅菌，與高壓滅菌器操作相關(guān)的最基本的要求是確保在滅菌前將滅菌器內(nèi)空氣去除，因為熱空氣是實現(xiàn)無菌的非常差的介質(zhì)。因此，在多孔負荷的高壓滅菌器中滅菌失敗幾乎都是由于空氣被困在負荷中。另一個需要評估的領(lǐng)域是確保負載是干的；由于蒸汽質(zhì)量的問題而產(chǎn)生的濕負載是非無菌的標志。

此外，已有較多企業(yè)在滿足相容性的前提下大量使用無菌的一次性塑料設(shè)備來降低滅菌過程引發(fā)的各類風(fēng)險。

（7）無菌過濾。與通過高溫使微生物滅活的過程不同，過濾是一種通過“去除”的方式降低微生物負荷的方法。過濾通常在無菌產(chǎn)品生產(chǎn)過程的不同階段進行。對于無菌灌裝的產(chǎn)品，半成品在進行灌裝前，最后一個步驟通常采用過濾除菌的方法。過濾方法已廣泛應(yīng)用于無菌液體制劑的生產(chǎn)和氣體的無菌處理中。

過濾的一個重要前提是對濾膜、濾芯等進行孔隙和完整性測試。目前常用的無菌濾芯孔徑為0.22μm^[2]，完整性測試方法主要有起泡點檢測、前進流檢測以及水侵入檢測。常見的過濾器失效的主要原因有：殼體裝配不正確（發(fā)生頻繁高）；有缺陷或有缺陷的濾芯；膜失效（發(fā)生頻率低）；濾器本身存在微生物生長。

（8）生物凈化。用于無菌灌裝的隔離器等設(shè)備應(yīng)經(jīng)過生物凈化處理。最常見的方法是使用過氧化氫蒸汽。由于過氧化氫蒸汽沒有滲透能力，因此歐盟監(jiān)管機構(gòu)未將其歸類為消毒過程。

汽化過氧化氫（Vaporized Hydrogen Peroxide，VHP）是常用的隔離技術(shù)。常見的VHP制備方法是將液態(tài)過氧化氫汽化（在120℃），得到VHP和水蒸氣的混合物。作為一個“干燥”過程，VHP的濃度保持在一個給定的凝結(jié)點以下，這取決于區(qū)域溫度。與其他氣體去污劑相比，過氧化氫分解為水和氧，安全性較高，凈化過程無殘留。

選擇VHP方法必須考慮被凈化設(shè)備的物理性能，一般要求相對光滑，不透水，并且形狀允許所有表面暴露在蒸汽中。評估的關(guān)鍵參數(shù)包括過氧化氫蒸汽的濃度、濕度、溫度和蒸汽停留時間。

（9）偏差。一般來說，生產(chǎn)過程中應(yīng)嚴格按照批準的流程操作，盡可能避免偏離工藝規(guī)程或者SOP的情況出現(xiàn)。任何偏離原有生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標準、操作規(guī)程等情況應(yīng)進行如實記錄，并開展詳細調(diào)查，評估偏差對生產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，同時，要進行詳盡調(diào)查，找出發(fā)生偏差的根本原因，并采取適當?shù)募m正和預(yù)防措施，避免此類情況的再次發(fā)生。

（10）其他方面。除以上重點關(guān)注情況外，需要考慮影響灌裝過程的其他因素，特別是那些可能影響無菌保證評估的方面，如停機記錄、生產(chǎn)線清洗記錄、設(shè)備和房間清潔記錄以及設(shè)備校準狀態(tài)、任何影響生產(chǎn)過程的變更等。

Part 3 批處理記錄管理

與構(gòu)成質(zhì)量體系的其他文件一樣，藥品批記錄應(yīng)符合GMP原則。這一理念是指使用清晰的書面程序，旨在防止錯誤，并允許跟蹤與藥品的生產(chǎn)、檢測和放行有關(guān)的所有活動。要做到這一點，批記錄的設(shè)計、編制、審核和分發(fā)必須受控管理。

此外，文件必須有明確的內(nèi)容：標題、性質(zhì)和目的應(yīng)明確說明。它們必須有序地擺放，易于檢查。復(fù)印文件必須清晰易讀。作為過程的一部分，文件必須定期審查與評估并保持最新。當一個文件被修訂后，必須對系統(tǒng)進行操作，以防止無意中使用被取代的文件（例如，只有當前的文件可以使用）。

批記錄應(yīng)清晰易讀，且使用合適的不能擦去的介質(zhì)記錄。必須為記錄提供足夠的空間。對批記錄所作的任何更正必須簽名并注明日期，且更正后內(nèi)容必須允許閱讀原始信息。通常情況，應(yīng)記錄更正的原因。在采取每項措施時，記錄中的每一項記錄都必須保存，以便所有與臨床前研究、臨床試驗以及產(chǎn)品的生產(chǎn)和控制有關(guān)的活動都是可追溯的。

記錄采用數(shù)字資料形式的應(yīng)確保關(guān)鍵記錄的存儲安全。即存儲在一個安全的系統(tǒng)中，只有經(jīng)過授權(quán)的人員才能進行有限的訪問。存儲位置必須確保充分保護，防止丟失、破壞或偽造，以及由于火災(zāi)、水等造成的損壞。同時應(yīng)當采用磁帶、縮微膠卷、紙質(zhì)副本或其他方法對數(shù)據(jù)進行備份，確保數(shù)據(jù)安全，便于查閱。