一. 定性分析

    選擇合適的溶劑（非極性），使用有足夠純度單色光的分光光度計(jì)，在相同的條件下測定相近濃度的待測試樣和標(biāo)準(zhǔn)品的溶液的吸收光譜，然后比較二者吸收光譜特征：吸收峰數(shù)目及位置、吸收谷及肩峰所在的位置（ l ）等；分子結(jié)構(gòu)相同的化合物應(yīng)有完全相同的吸收光譜。

二. 定量分析

（一）單組分定量分析方法

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法：配制一系列（5~10）個(gè)不同c的標(biāo)準(zhǔn)溶液 ，在適當(dāng)l —— 通常為 l_max下，以適當(dāng)?shù)目瞻兹芤鹤鲄⒈�，分別測定A，然后作 A-c 曲線同條件下測定試樣溶液吸光度 A_x ，查找對應(yīng)的 c_x 。

2. 直接比較法：已知試樣溶液基本組成，配制相同基體、相近濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別測定吸光度A_標(biāo)、A_樣

   根據(jù) L-A 定律： A_標(biāo) = K · b · c_標(biāo)            A_樣 = K · b · c_樣

   則                                              (18)

（二）多組分定量分析

    混合組分的吸收光譜相互重疊的情況不同，測定方法也不相同，常見混合組分吸收光譜相干擾情況有以下三種：

圖5  混合組分吸收光譜的三種相干情況示意圖

1.第一種情況：各種吸光物質(zhì)吸收曲線不相互重疊或很少重疊，則可分別在l₁ 及 l₂ 處測定 a  及 b 組分的 c；

2. 第二種情況  部分重疊：先在 l₁ 處測得 c_a  ,再在 l₂ 處測得混合組分的吸光度 A_a+b ，根據(jù)吸收定律加和性：

即可求得c_b。[應(yīng)先求得 e_{a(l2 )} ，與 e_{a(l2 )} ，并使用相同 b ]

3. 第三種情況:兩吸收曲線互相重疊，但服從 L-B 定律

(1) 解方程組法：

若試樣中需要測定兩種組分，則選定兩個(gè)波長l₁ 及 l₂ ，測得試液的吸光度為 A₁和 A₂，則可解方程組求得組分a、b 的濃度c_a、c_b ：

    如果混合物含有 n 個(gè)組分，可不經(jīng)分離，在 n 個(gè)適當(dāng)波長處進(jìn)行 n 次測量，獲得 n個(gè)吸光度值，然后解 n 個(gè)聯(lián)立方程以求得各組分的濃度。

（2）等吸光度雙波長（消去）法

吸收光譜重疊的 d、e 兩組分共存，現(xiàn)設(shè)法把一種組分(a)的吸光度消去。方法如下：

圖6  二組分混合物吸收光譜用作圖法選擇l₁、l₂（雙波長分光光度法）

   選取兩個(gè)適當(dāng)?shù)牟ㄩLl₁ 和 l₂ ，

使 e₁^d= e₂^d ，而盡可能大，則用這兩個(gè)波長l₁ 和 l₂測得混合物溶液吸光度之差 ∆A 應(yīng)只與 c_e 成正比（而與c_d無關(guān)），直接測得c_e ：

   因?yàn)?/SPAN>             所以    

   若用 1cm 吸收池

    若需測定另一組分 d 時(shí)，也可用同樣方法，選擇另一個(gè)l₁’ 和 l₂’ ，先消去的 e 的干擾，直接求c_d