1.修訂標(biāo)準(zhǔn)中培養(yǎng)基和試劑像菌落總數(shù)一樣增加了大腸菌群計數(shù)測試片，并且規(guī)定了性能要求：應(yīng)以發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣為陽性結(jié)果判斷為依據(jù)，也就是測試片上必須是有氣泡。同時其性能要符合GB4789.28中相關(guān)培養(yǎng)基的質(zhì)量要求。

修訂標(biāo)準(zhǔn)中要求對于乳及乳制品，無論是VRBA平板計數(shù)還是測試片計數(shù)，培養(yǎng)溫度均為30 ℃ ±1 ℃，而BGLB復(fù)發(fā)酵的培養(yǎng)溫度依然為36 ℃ ±1 ℃。

原因分析：

由于國內(nèi)外文獻(xiàn)報道，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對于自然污染大腸菌群的生乳，無論是使用VRBA平板計數(shù)還是測試片計數(shù)，培養(yǎng)溫度為30℃時乳制品中大腸菌群平板計數(shù)的結(jié)果，顯著高于培養(yǎng)溫度為36℃的計數(shù)結(jié)果。

2.對LST肉湯管乳糖發(fā)酵產(chǎn)氣的觀察修改為：小倒管或產(chǎn)氣收集裝置內(nèi)有氣泡產(chǎn)生，或輕輕振搖LST肉湯管可見試管內(nèi)有細(xì)密氣泡不斷上升者判斷為產(chǎn)氣。 

3.修訂標(biāo)準(zhǔn)中平板菌落驗(yàn)證試驗(yàn)的選擇：

從同一稀釋度的VRBA平板上挑取典型和可疑菌落各5個,少于10個者,則挑取其全部菌落。

典型和可疑菌落的描述：

典型菌落為紅色至紫紅色，菌落周圍帶有或不帶膽鹽沉淀環(huán),菌落直徑一般大于0.5mm�？梢删�落為紅色至紫紅色,菌落直徑一般小于0.5 mm.

內(nèi)容來自分享報告《GB4789.3-2016大腸菌群計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)修訂進(jìn)展》

1.修改樣品前處理、增菌等：

修訂標(biāo)準(zhǔn)中樣品前處理：乳粉樣品從快速混勻，改用室溫浸泡1小時后再進(jìn)行預(yù)增菌。

 原因分析：

乳粉是經(jīng)過高溫噴霧干燥的產(chǎn)品，其中的沙門氏菌一般處于受損狀態(tài)。乳粉中沙門氏菌檢驗(yàn)的前處理， 如果進(jìn)行快速混勻，適應(yīng)了乳粉干燥環(huán)境的受損沙門氏菌可能會出現(xiàn)滲透壓休克。采用浸泡法室溫靜置一段時間后再進(jìn)行預(yù)增菌，可以促進(jìn)受損沙門氏菌的復(fù)蘇。

2.培養(yǎng)基修改：增加RVS代替SC作為選擇性增菌液，培養(yǎng)溫度為42℃。并且TTB培養(yǎng)基培養(yǎng)時間增加了一個36℃。

內(nèi)容來自征求意見稿《GB 4789.4 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)》

致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)修訂要點(diǎn)：

1.ETEC的stp基因引物序列位點(diǎn)存在一定的突變，考慮優(yōu)化修改。

2.根據(jù)風(fēng)險監(jiān)測數(shù)據(jù)，astA作為EAEC的鑒定基因在食品檢測中假陽性率較高，考慮刪除此基因。

3.增加實(shí)時熒光PCR方法

4.配套GB 29921-2021

2013：O157:H7不得檢出（4789.36）

   牛肉制品、生食果蔬制品

2021：DEC不得檢出（4789.6）

   牛肉制品、即食生肉制品、發(fā)酵肉制品類；

   去皮或預(yù)切水果、去皮或預(yù)切的蔬菜及上述類別混合食品；

內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂進(jìn)展》

承擔(dān)單位：中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院、龍巖出入境檢驗(yàn)檢疫局

主要修訂內(nèi)容：

增加生產(chǎn)過程抽樣

增加快速檢驗(yàn)方法

刪除染色鏡檢要求

內(nèi)容來自分享報告《商業(yè)無菌檢驗(yàn)方法應(yīng)用現(xiàn)狀》

主要修訂內(nèi)容：

1.新增了參比培養(yǎng)基的質(zhì)控要求：

2.新增分子生物學(xué)檢驗(yàn)試劑的質(zhì)控評定方法

3.新增國內(nèi)菌種保藏中心菌株

CMCC：中國醫(yī)學(xué)細(xì)菌保藏管理中心

CICC：中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心

4.整合了附錄D和E，標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施后，培養(yǎng)基生產(chǎn)廠商質(zhì)檢和使用者驗(yàn)收都需要采用現(xiàn)行附錄D的驗(yàn)收形式。

5.新增28套培養(yǎng)基評價方法。

內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂進(jìn)展》、征求意見稿等。

主要修訂內(nèi)容：

1.增加了OA李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配方。

2.增加了Fraser增菌肉湯（FB1、FB2）培養(yǎng)基和試劑；

原因分析：

由于國際、國外標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，ISO標(biāo)準(zhǔn)采用了Fraser增菌肉湯(FB1、FB2)，分離平板包含OA李斯特氏菌顯色平板，征求意見稿參照ISO的方法，對其培養(yǎng)基進(jìn)行調(diào)整，與國際接軌；增菌培養(yǎng)基由原來的“李氏增菌肉湯 LB(LB1,LB2)”改為“Fraser 增菌肉湯(FB1、FB2)”，分離培養(yǎng)基增加 “OA李斯特氏菌顯色平板”。

內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂進(jìn)展》

包括檢驗(yàn)項(xiàng)目有：雙歧桿菌（修訂）、乳球菌（制定）、片球菌（制定）、魏茨曼氏菌（制定）；

標(biāo)準(zhǔn)主題構(gòu)架：包含菌種計數(shù)和鑒定兩部分

計數(shù)：純菌種+食品樣品、平板計數(shù)法

鑒定（選做）：

表型鑒定

生化鑒定

增加分子生物學(xué)方法：（PCR/熒光PCR）

內(nèi)容來自分享報告《食品安全微生物檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂進(jìn)展》