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干熱滅菌和濕熱滅菌是微生物實(shí)驗(yàn)室日常工作操作中最重要也是最常用的滅菌手段。
濕熱滅菌以高壓蒸汽滅菌和煮沸滅菌等為主，前者的原理是直接用蒸汽滅菌，蒸汽具有的大量的熱量和強(qiáng)大的穿透力，破壞菌體蛋白和核酸的化學(xué)鍵，使酶失活，微生物因代謝障礙而死亡。
絕大部分的培養(yǎng)基的滅菌方式是濕熱滅菌——121℃15min，少量培養(yǎng)基如沙門(mén)SC等只能煮沸滅菌。對(duì)于設(shè)備和器具來(lái)說(shuō)，如果進(jìn)行濕熱滅菌，應(yīng)該采用121oC20min，適用于玻璃器皿、移液器槍頭、塑料瓶等。按照GB 15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)滅菌效果。
那么為什么培養(yǎng)基的常規(guī)工藝定為121℃15min？
培養(yǎng)基的滅菌主要有兩個(gè)目的，一是盡可能的殺死全部雜菌及其芽孢，二是最大限度的保留培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分。
濕熱滅菌條件的選擇應(yīng)考慮被滅菌物品的熱穩(wěn)定性、熱穿透力、微生物污染程度等因素，但無(wú)論采用何種滅菌時(shí)間和溫度參數(shù)，都必須證明所采用的滅菌工藝和監(jiān)控措施在日常運(yùn)行過(guò)程中能確保滅菌后的SAL<=10-6。
SAL指滅菌處理后單位產(chǎn)品上存在活微生物的概率，通常表示為10-n。如，設(shè)定SAL為10-6，即經(jīng)滅菌處理后在一百萬(wàn)件物品中最多只允許有一件物品存在活微生物此時(shí)間已經(jīng)是過(guò)度滅殺。
干熱滅菌以電熱鼓風(fēng)干燥箱和火焰灼燒為主，其滅菌原理是利用高溫對(duì)微生物有氧化、蛋白質(zhì)變性和電解質(zhì)濃縮作用來(lái)滅殺微生物。
采用干燥箱滅菌。160oC滅菌2h， 180℃滅菌1h，適用于玻璃器皿，不銹鋼器具等。
干熱過(guò)度滅殺后產(chǎn)品的SAL<10-12,此時(shí)物品一般無(wú)需再進(jìn)行滅菌微生物的測(cè)定。
