原理:利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌,來測定熱力滅菌的效果。嗜熱脂肪桿菌的芽孢對熱的抗性較強(qiáng),其耐熱能力與病原微生物肉毒梭菌芽孢相似,以此為指示菌,驗(yàn)證滅菌器能否達(dá)到滅菌要求。
生物指示劑分為三種:芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養(yǎng)基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點(diǎn):下層的前、中、后和上層、中層的中央點(diǎn)。滅菌后取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中,55-60℃培養(yǎng)2-7天,若培養(yǎng)基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死,滅菌器滅菌效果良好;如果培養(yǎng)基黃色渾濁,說明芽孢未被殺滅,滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗(yàn)證方法均是如此。
目前實(shí)驗(yàn)室還常用商品化的生物指示管,其原理與芽孢懸液和芽胞菌片相同,指示管中有嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢和培養(yǎng)液玻璃小管,將指示管放在滅菌容器內(nèi)的各個點(diǎn)上,高壓滅菌后,將管中盛培養(yǎng)液的玻璃管擠碎,培養(yǎng)液從內(nèi)部的小管中被放出,放入56℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格,指示管內(nèi)的芽孢復(fù)活后生長會改變?nèi)鉁念伾侨鉁優(yōu)辄S色;若是滅菌器滅菌效果良好則管內(nèi)芽孢被滅活不再生長,肉湯仍舊是原來的紫色。
對于滅菌器的效果驗(yàn)證,目前并沒有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格的要求驗(yàn)證的頻次,但是實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)自行制定驗(yàn)證頻次規(guī)定,并嚴(yán)格按照要求進(jìn)行。從操作性和驗(yàn)證結(jié)論兩個方面出發(fā),小編推薦使用指示膠帶和生物指示管,因?yàn)檫@兩種方法操作簡單,可以對滅菌效果進(jìn)行全面的驗(yàn)證。