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移液器9大問題!你用對它了嗎?

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2021-06-07
核心提示:移液器是實驗操作上不可缺少的工具,對于頂尖高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復再現(xiàn)性好,那就要注意正確移液槍使用,避
 移液器是實驗操作上不可缺少的工具,對于頂尖高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復再現(xiàn)性好,那就要注意正確移液槍使用,避免因小失大。本文為大家劃重點整理了移液器使用知識要點。

 

移液九部曲

1、裝吸頭

移液器套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。

     

錯誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。

 

2、量程設(shè)定

操作之前請先選擇正確的移液器,移液器可在10~100%量程范圍內(nèi)操作,但在10%量程處操作對于移液技巧要求高,故推薦在35~100%量程范圍內(nèi)操作。

 

量程調(diào)節(jié):當由小量程調(diào)節(jié)至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當由大量程調(diào)節(jié)至小量程時,直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。

 

3、潤洗  

粘稠液體可以通過吸頭預潤濕的方式來達到精確移液,先吸入樣液,打出, 吸頭內(nèi)壁會吸附一層液體,使表面吸附達到飽和,然后再吸入樣液,最后打出液體的體積會很精確。

 

用同一樣品重復吸液排液二至三次,潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。對常溫樣品,吸頭潤洗有助于提高準確性;但是對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準確性,請使用者特別注意。

 

4、吸頭浸入角度

吸液時盡量保持垂直狀態(tài),傾斜角度不能超過20°

 

5、吸頭浸入深度


 

6、吸頭浸入時間

吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。

 

7、吸液速度

勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部,污染活塞等部件。

 

8、排液及吹液

先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進行吹液。

 

排液四種方式:

 

 

9、手溫

移液器不宜長時間握在手里,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。

 

移液槍使用訣竅

 

1、影響移液槍精度因素

(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差;  

(2)氣密性:tip和槍體的結(jié)合部,以及槍內(nèi)柱體之間的長期磨損,造成誤差;

(3)吸速:容易造成tip內(nèi)氣泡產(chǎn)生,而且會污染槍頭;

(4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內(nèi)壓增高,結(jié)果在壓出液體時,壓力變大,而產(chǎn)生誤差;

 

解決辦法:反復抽吸4~5次就可改善。

 

2、使用注意事項

 

(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣;

(2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為,吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差;

(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設(shè)定;

(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g;

(5)移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器;

(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液;

(7)在設(shè)置量程時,請注意,旋轉(zhuǎn)到所需量程,數(shù)字清楚顯示在窗中,所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則,會卡住機械裝置,損壞移液器。

(8)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機物等)。

(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。

(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。

 

移液器的自行檢測


移液器在使用過程中,如果懷疑其精確度,可根據(jù)以下提示自行檢測:

 

1、移液器是否有漏氣?

自行檢測:目視法檢測:將吸取液體后的移液器垂直靜置15秒,觀察是否有液滴緩慢的流出。若有流出,說明有漏氣現(xiàn)象。壓力泵檢測:使用專用的壓力泵,檢測壓力情況,判斷是否漏氣。

 

可能的原因:

(1)吸頭是否匹配?—— 使用原裝匹配的吸頭

(2)裝配吸頭時有無上緊?

(3)移液器內(nèi)部氣密性不好?

 

2、環(huán)境的溫度差異是否會影響準確度?

移取液體的溫度與吸頭和移液器的溫度不一致的情況下,液體溫度高于吸頭的,移取的液體體積會偏大,液體溫度低于吸頭的,移取的液體體積會偏小。

 

3、樣品的密度和水是否有明顯的區(qū)別?

大部分移液器出廠前的校準是用水作為標準液進行測試的,如果所操作的液體與水的比重有很大差異,所給出的不精確度和不準確度就不能滿足,從而產(chǎn)生誤差。

 

4、吸液速度太快是否會導致體積不準確?

吸液速度太快會產(chǎn)生反沖和氣泡,導致移液體積不準確。

 

ps:移液器長時間不用時建議將刻度調(diào)至最大量程,讓彈簧恢復原形,延長移液器的使用壽命。

 

移液器錯誤操作及處理

 

做為液體操作中最常用的手動可調(diào)精密移液器,在使用過程中有些錯誤的操作會給操作本身帶來誤差,有些會造成機器的損壞等,在這里簡單總結(jié)如下:

 

1、錯誤:裝配吸頭時用移液器反復撞擊吸頭,以上緊;

正確:插入吸頭,左右輕轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)上緊吸頭;分析:撞擊會造成移液器內(nèi)部齒輪組合的松動,長期操作會對移液器的精確性造成影響;

 

2、錯誤:吸頭與移液器不匹配,影響氣密性;

正確:選用與移液器匹配、有質(zhì)量保證的吸頭;

 

分析:吸頭的不匹配,主要表現(xiàn)為對氣密性的影響。會直接影響移液器的精確性,通常會移液操作會小于設(shè)定量;

 

3、錯誤:吸液時,移液器傾斜吸液;

正確:垂直吸液;

 

分析:傾斜的狀態(tài)會造成氣壓面的改變。會對移液精度造成影響;

 

4、錯誤:吸頭內(nèi)含有未打出的液體時,移液器平置于桌面;

正確:將移液器垂直掛在移液器支架上;

 

分析:吸頭內(nèi)含有未打出液體,移液器平放之后液體有可能會流到移液器體內(nèi)部,這會對移液器內(nèi)部組件造成影響,嚴重的會造成損壞,較差污染等情況的發(fā)生;

 

5、錯誤:用大量程的移液器移取小體積的液體;

正確:移液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內(nèi)才符合不準確度和不精確度的要求;

 

分析:因為空氣墊的存在,是造成移液器不準確度的主要原因。移液器的選擇應該是最大量程,最接近目的液體轉(zhuǎn)移量的選型原則;

 

6、錯誤:吸取具有強揮發(fā)性的液體;

正確:不建議用普通移液器做強揮發(fā)型液體轉(zhuǎn)移;

    

分析:如果一定要移取強揮發(fā)性的液體,應該在移液結(jié)束后立刻拆開移液器,讓蒸汽揮發(fā),同時,建議使用外置活塞式移液器;

 

7、錯誤:吸液速度和放液速度過快;

正確:慢吸慢放;

 

分析:快吸對于1mL及以上量程的移液器,很容易造成液體上沖,過快的放液會增加液體的殘留量。


編輯:songjiajie2010

 
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