今天,小編就和大家說說菌落總數(shù)檢測中常見的一些問題。
菌落總數(shù)知識
1
食品中測定的菌落總數(shù)就是食品的細(xì)菌總數(shù)嗎?
按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定,即在需氧情況下,36±1℃培養(yǎng)48±2h,能在平板計數(shù)瓊脂平板上生長的細(xì)菌菌落總數(shù),因此,厭氧或微需氧菌等,由于現(xiàn)有條件不能滿足其需求,故難以繁殖生長。
2
菌落總數(shù)的單位CFU和“個”有區(qū)別嗎?
菌落形成單位叫做CFU。CFU是形成菌落的個數(shù),不等于細(xì)菌個數(shù)。比如兩個相同的細(xì)菌靠的很近或粘在一起,那么經(jīng)過培養(yǎng)這兩個細(xì)菌將會形成一個菌落,此時就是2個細(xì)菌,1CFU。
3
菌落總數(shù)超標(biāo)會導(dǎo)致食物中毒嗎?
不一定,菌落總數(shù)測定是用來判斷食品被細(xì)菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量,反應(yīng)食品在生產(chǎn)過程中是否符合衛(wèi)生要求,以便被檢樣品做出適當(dāng)?shù)男l(wèi)生學(xué)評價。
4
菌落總數(shù)超標(biāo)如何追溯?
在日常抽檢中發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品菌落總數(shù)超標(biāo),可以從以下三個環(huán)節(jié)進行追溯:
(1)生產(chǎn)環(huán)節(jié)
如果在不合格食品同批次庫存產(chǎn)品多次抽樣檢驗,均出現(xiàn)菌落總數(shù)超標(biāo)的情況,那極有可能是生產(chǎn)環(huán)節(jié)原輔料、人員、設(shè)備環(huán)境等受污染所影響;
(2)儲存運輸
對同批次其他產(chǎn)品進行多次抽樣檢驗,均未檢出菌落總數(shù)超標(biāo)的現(xiàn)象,那么有可是出現(xiàn)在產(chǎn)品裝卸搬運過程中;
(3)儲存擺放環(huán)節(jié)
若在流通環(huán)節(jié)檢出多種食品存在菌落總數(shù)超標(biāo)的情況,則問題極有可能是未按照規(guī)定要求存儲、擺放食品,致使微生物滋生。
貳
實驗過程中的問題
1
為什么平板計數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH?
培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長要求。平板計數(shù)瓊脂是用來檢測樣品中的菌落總數(shù)的,而大部分細(xì)菌都是嗜中性的,所以需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH至7.0±0.2,保證細(xì)菌生長環(huán)境的適宜,從而確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2
為什么菌落總數(shù)培養(yǎng)條件為36±1℃培養(yǎng)48±2h,而水產(chǎn)品要求30±1℃培養(yǎng)72±3h?
對于未經(jīng)過任何加工的水產(chǎn)品,其菌落總數(shù)培養(yǎng)條件為30±1℃培養(yǎng)72±3h;
因為水中本身溫度較低,未加工的水產(chǎn)品中微生物主要來源于水體,30℃、72h是水中微生物最適培養(yǎng)溫度和時間。而加工水產(chǎn)品和其他產(chǎn)品培養(yǎng)條件都是36±1℃培養(yǎng)48±2h,其實就是產(chǎn)品本身的菌和加工過程中帶入的菌的最適培養(yǎng)溫度和時間不同的問題。
3
如何保證檢測結(jié)果的有效性?
檢驗過程中需要做空白對照,用來判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染。并做好定期檢測空氣潔凈度,判斷實驗環(huán)境是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。
叁
菌落計數(shù)小問題
1
菌落蔓延的原因及解決辦法?
菌落蔓延主要有兩個原因,一是操作不當(dāng);二是樣品中含有變形桿菌等運動性強的細(xì)菌。
操作中需要注意3個關(guān)鍵點:
(1)傾注培養(yǎng)基時搖晃平皿使其混合均勻,減少菌塊;
(2)樣品稀釋后,盡快傾注平板。從稀釋到傾注結(jié)束時間控制在30 分鐘之內(nèi),避免樣液干涸造成菌落成團;平板凝固后馬上倒置。
(3)若樣品中含有變形桿菌,則可以覆蓋一層培養(yǎng)基。
2
如何區(qū)分細(xì)菌菌落與食品顆粒?
如果平板上食品顆粒與菌落形態(tài)較為接近,為避免和細(xì)菌菌落發(fā)生混淆,可多傾注一塊平板置于4℃冰箱中放置,在計數(shù)時用于對照。另外也可以在已融化而保溫在46℃水浴的PCA中加入0.5%TTC溶液,培養(yǎng)后食品顆粒不變色,細(xì)菌為紅色。注意TTC的濃度不要過高,會有抑制細(xì)菌生長作用(食品檢測一般不建議使用TTC,會有一定的抑菌效果)。
3
異常現(xiàn)象平板如何進行菌落計數(shù)?
我們通過以下表格查看:
現(xiàn)象 | 計數(shù)方式 |
無任何明顯界限的鏈狀菌落 |
作為一個菌落 |
有幾條不同來源的鏈 |
每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算 |
片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻 |
半個平板的菌落數(shù)乘2代表整塊平板的菌落數(shù) |
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