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工作菌株不允許傳代?我是真的不懂了

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-06-14
核心提示: 在微生物檢測(cè)工作中,菌株是不可或缺的生物資源,用于各種質(zhì)量控制活動(dòng),如培養(yǎng)基驗(yàn)收、試驗(yàn)對(duì)照、人員培訓(xùn)考核和方法確認(rèn)
 在微生物檢測(cè)工作中,菌株是不可或缺的生物資源,用于各種質(zhì)量控制活動(dòng),如培養(yǎng)基驗(yàn)收、試驗(yàn)對(duì)照、人員培訓(xùn)考核和方法確認(rèn)。菌株傳代是實(shí)驗(yàn)室中一個(gè)常見的話題。通過有效的傳代管理,可以確保菌株的質(zhì)量和穩(wěn)定性,進(jìn)而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。近幾天小編所在的微信交流群中,幾位業(yè)內(nèi)專家就“工作菌株能不能傳代”的問題進(jìn)行了一些討論和知識(shí)分享,小編進(jìn)行了匯總,也搜集了一些資料,在這里分享給大家。
先來看一下:菌株來源與代數(shù)管理相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求:

01
GB 4789.28-2024 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求


標(biāo)準(zhǔn)菌株

直接從專業(yè)菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得并至少定義到屬或種水平的菌株。按菌株特性進(jìn)行分類和描述,最好來源于食品,水或其生產(chǎn)環(huán)境中的菌株。

 

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株

將標(biāo)準(zhǔn)菌株在實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)接一代后得到的一套完全相同的獨(dú)立菌株。


儲(chǔ)備菌株

從標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株轉(zhuǎn)接一代獲得的獨(dú)立菌株。


工作菌株

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品或標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株﹑儲(chǔ)備菌株轉(zhuǎn)接一代獲得的直接用于測(cè)試使用的菌株。
02
CNAS-CL01-A001:2022檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用說明


03
GB/T 27405-2008 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測(cè)


03
中國(guó)藥典2020版》(四部)


9203藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則中對(duì)菌種有了較為明確的規(guī)定:

以上標(biāo)準(zhǔn)均提到菌株需要來源于官方保存機(jī)構(gòu),且工作菌株傳代次數(shù)不能超過5代。




 

 

這里的工作菌株不能傳代5次,指的是什么?工作菌株可以繼續(xù)傳代嗎?可能一些檢驗(yàn)員有時(shí)會(huì)感到困惑,為什么會(huì)有這樣的規(guī)定呢?

 

“工作菌株”不允許傳代,這是個(gè)基本原則。

 

一是:為了防止菌株的突變。在培養(yǎng)中,菌株在傳代過程中往往會(huì)發(fā)生一些變異,這些變異可能影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
二是:工作菌株的來源方式、儲(chǔ)存方式都不足以保證其自身往下傳代的穩(wěn)定性。

關(guān)于這里的工作菌株不能傳代5次,具體指的是?

工作菌株只能和其上一代的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株之間存在著代謝關(guān)系,工作菌株通常使用第三至第五代。
具體來說就是第三代的工作標(biāo)準(zhǔn)菌株是從第二代的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株培養(yǎng)而來,第四代的工作標(biāo)準(zhǔn)菌株則由第三代的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株發(fā)展而來,第五代的工作標(biāo)準(zhǔn)菌株則由第四代的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株繁衍而來。
1代是指將活的培養(yǎng)物接種到新鮮培養(yǎng)基中,任何形式的接種培養(yǎng)均被認(rèn)為是轉(zhuǎn)種或傳代一次。必要時(shí),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)工作菌株的特性和純度進(jìn)行確認(rèn)。
相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)中也已經(jīng)明確規(guī)定,標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株才可以延續(xù)向下傳代,工作菌株不得進(jìn)行傳代。

ISO 11133:2014:


 

原種培養(yǎng)物不得用于制備參比菌株或參比原種。

5.3.5 工作菌株

工作菌株是從原種或參考原種中制備的,用于制備供試驗(yàn)用的接種物。
工作菌株不得用于制備參比菌株、參比菌種或原種菌株,或用于制備進(jìn)一步的工作菌株。

 

GB/T 27405-2008 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測(cè)附錄流程里有明確的規(guī)定:


 

 

 

總之,菌株傳代只能由上往下傳,儲(chǔ)備菌株可以做為工作菌株使用,但工作菌株不能做為儲(chǔ)備菌株使用,即如果儲(chǔ)備菌株作為工作菌株使用后,該株菌株使用后只能進(jìn)行銷毀,不可再進(jìn)行傳代保藏。

實(shí)驗(yàn)室使用的工作菌株一般不可超過第5代,除非標(biāo)準(zhǔn)方法中有明確要求,或?qū)嶒?yàn)室能夠證明菌株相關(guān)特性沒有改變。若在傳代過程中出現(xiàn)明顯變異,也不可繼續(xù)使用。

 


注:文章的觀點(diǎn)來自專家討論和小編的理解,僅供大家參考,如果有疑問,歡迎大家留言探討。


編輯:songjiajie2010

 
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