国产黄片无马赛克在线观看_国产成人在线播放_国产综合A级片视频_亚洲va无码va亚洲

食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號
當(dāng)前位置: 首頁 » 檢驗技術(shù) » 食品微生物檢驗技術(shù) » 正文

常見菌落總數(shù)的操作方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-04-28
核心提示: 菌落總數(shù)又稱需氧菌總數(shù)、嗜氧菌總數(shù),在英文標準中的術(shù)語有Total plate count, Standard plate-count bacteria, Aerobic
 菌落總數(shù)又稱需氧菌總數(shù)、嗜氧菌總數(shù),在英文標準中的術(shù)語有Total plate count, Standard plate-count bacteria, Aerobic bacterial count,Colonies number等,是微生物學(xué)檢測技術(shù)中應(yīng)用最廣泛的一種衛(wèi)生學(xué)檢測技術(shù),亦是嗜溫細菌和真菌的菌落總計數(shù),其通過一定條件下如需氧情況、營養(yǎng)條件、pH、培養(yǎng)溫度和時間等,每單位(如克、毫升等)檢樣所生長出來的微生物,在衛(wèi)生學(xué)上可以表示被污染程度的標志。

 

常見操作方法

 

菌落計數(shù)方法包括平皿法、薄膜過濾法和最可能數(shù)法(Most-Probable-Number Method,簡稱MPN法),其中平皿法可分為傾注平皿法和涂布平皿法,常見的菌落總數(shù)操作方法見表1。 

 






表1 常見菌落總數(shù)的操作方法匯總





 

測試標準

適用范圍

操作方法

GB4789.2-2022 《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》

食品

傾注平皿法/菌落總數(shù)測試片

FDA- Bacteriological Analytical Manual Chapter 3:2001《Aerobic Plate Count》

食品

傾注平皿法/螺旋板法

GB/T13093-2006 《飼料中細菌總數(shù)的測定

飼料

傾注平皿法

GB/T18204.9-2000 《游泳池水微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定》

游泳池水

傾注平皿法

GB/T5750.12—2023《生化飲用水標準檢驗方法  微生物指標》

飲用水/水源水

傾注平皿法/酶底物法

WS 394-2012 《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范 附錄D 集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)檢驗方法》

環(huán)境

六級篩孔撞擊式微生物采樣器

GB15979-2002 《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準  附錄B2》

一次性衛(wèi)生用品

傾注平皿法

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015版

化妝品

傾注平皿法

BS EN ISO 21149 (2017) 《Cosmetics- Microbiology -Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria》

化妝品

平皿法/膜過濾法

USP-NF 61 《MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS: MICROBIAL ENUMERATION TESTS》

藥品

平皿法/薄膜過濾法/MPN法

BP Appendix XVI B  《Microbiological Examination of Non-sterile Products》

EP 9.0 edition, Chapter 2.6.12《Microbiological examination of non-sterile products: microbial enumeration tests》

ChP1105 2020版《非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查:微生物限度計數(shù)》

 

根據(jù)上表的適用范圍和操作方法可得出,平皿法是使用范圍最廣。

 

根據(jù)測試標準適用范圍和樣品特性:

A.平皿法因可操作性性強,會更多用于污染度高的被檢樣品;

B.薄膜過濾法適用于測試量需求大且污染度一般的液體樣品;

C.MPN法可用于微生物計數(shù)時精確度較差時,包括對于某些微生物污染度很小的樣品。

 

故在日常測試中,可根據(jù)樣品的污染度情況去選擇更合適的菌落總數(shù)測試操作方法。

 

樣品的取樣量與稀釋液選擇

樣品的取樣量與其質(zhì)量標準或測試方法去選擇,對于官方標準未明確取樣量的,亦可根據(jù)結(jié)果的代表性加大取樣量。稀釋緩沖液的選擇則是要求樣品在稀釋緩沖液中能夠充分混合,從而保證樣品的均一性,故不同樣品,會有不同的稀釋液需求。日常工作中,常見的稀釋緩沖液與要求見表2。

 






表2 常見的稀釋緩沖液信息匯總





 

 

測試標準

樣品量

稀釋液

備注

GB4789.2-2022 《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》

25g/mL

無菌生理鹽水/磷酸鹽緩沖液

 

FDA- Bacteriological Analytical Manual Chapter 3:2001《Aerobic Plate Count》

50g/mL

磷酸鹽緩沖液/無菌水

 

GB/T13093-2006 《飼料中細菌總數(shù)的測定

25g/10g

0.85%生理鹽水/磷酸鹽緩沖液

 

GB/T18204.9-2000 《游泳池水微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定》

原液

無菌生理鹽水

 

GB/T5750.12—2023《生化飲用水標準檢驗方法  微生物指標》

原液

無菌生理鹽水

 

WS 394-2012 《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范 附錄D 集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)檢驗方法》

28.3L/min,(5-15)min

不適用

 

GB15979-2002 《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準  附錄B2》

10±1g

無菌生理鹽水(200mL)

不進行梯度稀釋,做5平行

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015版

10g/mL

無菌生理鹽水

無法充分溶解稀釋液中的樣品可加吐溫80和/或石蠟

BS EN ISO 21149 (2017) 《Cosmetics- Microbiology -Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria》

1:10(樣品:加稀釋液后)

無菌生理鹽水、磷酸鹽緩沖液、pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液等

 

最終的取樣量與稀釋液,需通過樣品方法學(xué)適用性驗證方能使用。

USP-NF 61 《MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS:MICROBIAL ENUMERATION TESTS》

BP Appendix XVI B  《Microbiological Examination of Non-sterile Products》

EP  9.0 edition, Chapter 2.6.12《Microbiological examination of non-sterile products: microbial enumeration tests》

ChP1105 2020版《非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查:微生物限度計數(shù)》

 

 

常見培養(yǎng)條件

菌落總數(shù)的培養(yǎng)條件會因不同的樣品類型或制定機構(gòu)而有所差異,其差異包括培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間的選擇。菌落總數(shù)常見的培養(yǎng)條件見表3。

 






表3 菌落總數(shù)的常見培養(yǎng)條件匯總





 

 

測試標準

培養(yǎng)基

培養(yǎng)溫度

培養(yǎng)時間

GB4789.2-2022 《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》

平板計數(shù)瓊脂(PCA)

36±1℃(水產(chǎn)品30±1℃)

48±2h(水產(chǎn)品72±3h)

FDA-Bacteriological Analytical Manual Chapter 3:2001《Aerobic Plate Count》

35±1℃(牛奶32±1℃)

48±2h

GB/T13093-2006 《飼料中細菌總數(shù)的測定

營養(yǎng)瓊脂(NA)

30±1℃

72±3h

GB/T18204.9-2000 《游泳池水微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定》

36±1℃

48h

GB/T5750.12—2023《生化飲用水標準檢驗方法  微生物指標》

36±1℃

48±2h

WS 394-2012 《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范 附錄D 集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)檢驗方法》

35~37℃

48h

GB15979-2002 《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準  附錄B2》

35±2℃

48h后

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015版

卵磷脂、吐溫80-營養(yǎng)瓊脂 (LTNA)

36±1℃

48±2h

BS EN ISO 21149 (2017) 《Cosmetics- Microbiology -Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria》

胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)

32.5±2.5oC

 

72±6h

USP-NF 61 《MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS: MICROBIAL ENUMERATION TESTS》

3~5天

BP Appendix XVI B  《Microbiological Examination of Non-sterile Products》

EP 9.0 edition, Chapter 2.6.12《Microbiological examination of non-sterile products: microbial enumeration tests》

ChP1105 2020版《非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查:微生物限度計數(shù)》

 

 

結(jié)果觀察與報告

菌落總數(shù)在進行計數(shù)時,肉眼觀察,必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器,記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位(CFU/cfu,Colony Forming Units)進行報告。在計數(shù)時,首先需明確計數(shù)范圍是否符合要求,從而保證測試結(jié)果的準確性和可靠性,不同的測試方法在首選計數(shù)范圍會有一定差異,以及顯色劑在觀察中的應(yīng)用也有一定的要求。詳情見表4。

 






表4  結(jié)果觀察與報告的一般要求





 

測試標準

培養(yǎng)基中是否可加顯色劑1

首選計數(shù)范圍

最終結(jié)果報告

GB4789.2-2022 

《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 菌落總數(shù)測定》

30~300cfu

100cfu以內(nèi)報整數(shù),超過100cfu兩位有效數(shù)字,>300cfu的則報告TNTC2,采用“四舍五入”。

FDA-Bacteriological Analytical Manual Chapter 3:2001《Aerobic Plate Count》

25~250cfu

<25cfu則報告<25或?qū)嶋H值,>250cfu則報告>250或TNTC2。

GB/T13093-2006 《飼料中細菌總數(shù)的測定

30~300cfu

100cfu以內(nèi)報整數(shù),超過100cfu兩位有效數(shù)字,>300cfu的則報告TNTC2。采用“四舍五入”。

GB/T18204.9-2000 《游泳池水微生物檢驗方法 細菌總數(shù)測定》

30~300cfu

100cfu以內(nèi)報整數(shù),超過100cfu兩位有效數(shù)字,>300cfu的則報告TNTC2。采用“四舍五入”。

GB/T5750.12—2023《生化飲用水標準檢驗方法  微生物指標》

30~300cfu

100cfu以內(nèi)報整數(shù),超過100cfu兩位有效數(shù)字,>300cfu的則報告TNTC2。采用“四舍五入”。

WS 394-2012 《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范 附錄D 集中空調(diào)送風(fēng)中細菌總數(shù)檢驗方法》

報告cfu/m3

GB15979-2002 《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準  附錄B2》

全部無生長報<4cfu/g(mL),若生長,報100cfu以內(nèi)報整數(shù),超過100cfu兩位有效數(shù)字。

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015版

30~300cfu

100cfu以內(nèi)報整數(shù),超過100cfu兩位有效數(shù)字,>300cfu的則報告TNTC2。采用“四舍五入”。

BS EN ISO 21149 (2017) 《Cosmetics- Microbiology -Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria》

平皿法:30~300cfu;薄膜過濾法:15~150cfu。

100cfu以內(nèi)報整數(shù),超過100cfu兩位有效數(shù)字。

USP-NF 61 《MICROBIOLOGICAL EXAMINATION

OF NONSTERILE PRODUCTS: MICROBIAL ENUMERATION TESTS》

平皿法:不超過250cfu;薄膜過濾法:記錄結(jié)果。

取兩位有效數(shù)字報告

BP Appendix XVI B  《Microbiological Examination of Non-sterile Products》

EP 9.0 edition, Chapter 2.6.12《Microbiological examination of non-sterile products: microbial enumeration tests》

ChP1105 2020版《非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查:微生物限度計數(shù)》

平皿法:不超過300cfu;薄膜過濾法:不超過100cfu

取兩位有效數(shù)字報告

注:

1. 顯色劑一般為TTC,TTC全稱為0.5%氯化三苯四氮唑。加此顯示劑后,多數(shù)菌落顯示紅色。

2. TNTC全稱為多不可數(shù),即Too Number To Count。

 

菌落總數(shù)的測定,不同樣品有不同的特性,故在進行此方面衛(wèi)生學(xué)測試時,結(jié)合行業(yè)需求,以及樣品的生產(chǎn)工藝、消費對象、使用方式等需求,選擇合適的測試操作流程,同時保證在報告結(jié)果時,亦需根據(jù)市場所選用的方法進行報告結(jié)果。

 

綜合以上,衛(wèi)生學(xué)的菌落測試在實驗操作中雖然有差異,但總體的差異性不大,比如培養(yǎng)基都是非選擇性生長培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度基本在35℃左右,培養(yǎng)時間則溫度越高,時間則可減少。故保證菌落總數(shù)測試結(jié)果的準確性與可靠性時,根據(jù)實際需求,通過調(diào)節(jié)測試方法的取樣、稀釋液、培養(yǎng)條件等來建立更符合本實驗室的菌落總數(shù)測試方法。



想了解更多資訊,歡迎關(guān)注“食品微生物檢測”公眾號;

 

添加微信13371394813申請加入微生物檢驗技術(shù)交流群!


編輯:songjiajie2010

 
分享:
 

 
 
推薦圖文
推薦檢驗技術(shù)
點擊排行
檢驗技術(shù)
 
 
Processed in 0.027 second(s), 13 queries, Memory 1.31 M